CFSE测细胞增殖为啥不明显

行棋无悔

各位老师、：
我用PMA+钙离子霉素刺激脾脏淋巴细胞4天，显微镜下明明看到细胞增殖，为什么流式检测确没有呢。请各位老师帮忙分析下。

叶绿素

可以看出你的PMA刺激组比阴性和肽刺激的有增殖了啊，因为CFSE是染的膜表面，细胞分裂增值爱，荧光就变弱了

行棋无悔

叶绿素 发表于 2019-11-12 09:31
可以看出你的PMA刺激组比阴性和肽刺激的有增殖了啊，因为CFSE是染的膜表面，细胞分裂增值爱，荧光就变弱了 ...

老师您好！PMA刺激组确实是增殖了的，我在显微镜下看得到，但是荧光强度相对阴性组差不多呀，而且还是单峰。这是啥原因呢

niwanmao

行棋无悔 发表于 2019-11-12 15:31
老师您好！PMA刺激组确实是增殖了的，我在显微镜下看得到，但是荧光强度相对阴性组差不多呀，而且还是单 ...

你这里隔了4天了，可能是不是全部分裂成子代了？
不过代数如此一致，感觉有点不可思议。

叶绿素

用CFSE测增殖本来就是一个峰吧，你要是想得到文献上的多峰图，需要用增殖软件去分析啊

叶绿素

niwanmao 发表于 2019-11-13 08:07
你这里隔了4天了，可能是不是全部分裂成子代了？
不过代数如此一致，感觉有点不可思议。 ...

倪老师，看您在重庆会议上的讲演了，目前临床很多都是用黄色管抽血然后离心取上清的做细胞因子的，您建议用EDTA抗凝的，是比较过数据更准确吗？比如他们已经用黄管积累了很多数据，再换紫管，数据还能接的上吗？

niwanmao

叶绿素 发表于 2019-11-13 10:07
倪老师，看您在重庆会议上的讲演了，目前临床很多都是用黄色管抽血然后离心取上清的做细胞因子的，您建议 ...

讲课的时候，展示的那篇文章，主要对比的是CXCL系列的因子。对于临床上在开展的炎性因子，可以衔接上。

行棋无悔

叶绿素 发表于 2019-11-13 10:04
用CFSE测增殖本来就是一个峰吧，你要是想得到文献上的多峰图，需要用增殖软件去分析啊 ...

你好，请问ModFIT LT这个软件可以去哪里下载呢

zengyikaren

画问号这一群应该是你扩增出来的细胞。

飞翔

叶绿素 发表于 2019-11-13 10:04
用CFSE测增殖本来就是一个峰吧，你要是想得到文献上的多峰图，需要用增殖软件去分析啊 ...

flowjo上可以分析吗