急！流式分选荧光多久才能淬灭？如何加速淬灭

zhongshi

      求各路大神帮忙解答，我用CD19-PE、CXCR5-BV421、CD14-FITC、CD4-APC标记扁桃体淋巴细胞后进行流式分选，得到B细胞后，经过处理1天，后续需要再用抗体标记上机检测一些指标，并且是用与原来分选不同的marker和颜色去搭配，结果发现原来标记的荧光素还在，并且很强，基本没有淬灭，严重干扰了我的监测。      求问，荧光多久才能淬灭？我该如处理才能加速其淬灭？

niwanmao

这几种荧光素都挺稳定的，期望它们淬灭的可能性比较小。
一般流式分选之后，阴性分选的标记不需要管，例如CD14、CD4你这里肯定是没有标上的，阳性的CD19和CXCR5，你可以将细胞培养48～72小时，让抗体充分被细胞内吞降解并释放之后，即可。