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[细胞周期] 请问如何在Flowjo中取消荧光补偿?

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发表于 2020-8-30 12:12:24 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏5流星未解决
本帖最后由 hclo 于 2020-8-30 12:48 编辑

各位好!请教一个问题:如下图所示,是较早的对于酵母细胞的流式结果,仪器是BD Fortessa,可以看到明显的G1、G2峰,CV值小。
截屏2020-08-30 12.45.02.png

但是目前以相同的条件相同的仪器重复,结果如下图,发现G1、G2峰基底宽厚,G2比G1峰高,CV值大。
截屏2020-08-30 12.43.28.png

更重要的是,对于直方图来说,FICT-A消失了,取而代之的是Comp-FICT-A。在Flowjo横坐标的选项中没有FICT-A,只有Comp-FICT-A,如下图所示。
屏幕快照 2020-08-30 下午12.08.27.png

因此,请问在Flowjo中能否将荧光补偿取消掉?这是不是一开始就有荧光补偿的,如果要取消只能重新进行实验?谢谢!

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发表于 2020-8-30 15:41:53 | 显示全部楼层
你是用什么染料测的?为什么是在FITC通道呢?
一般说来,补偿不大会影响周期结果,因为就单标,邻近通道不可能有荧光渗漏进来。所以我觉得需要从你的固定、破膜步骤上找原因,是否后一个样本这两步处理出现了问题?
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发表于 2020-9-7 17:08:16 | 显示全部楼层
Flowjo 软件会自动使用你在上机过程调整的补偿参数,如果需要显示不补偿的参数,需要在菜单栏设置“Display->show uncompensated parameters”
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