流式检测对照设置

niwanmao

1、如果需要确认抗体质量，可以用全血样本，单染看看，在淋巴细胞群体上和其它细胞群上的分群性能如何。LIN需要看里面的什么抗体组成，得看其排除干扰细胞是否彻底；CD45通常不太会有问题；CD127大多只能用T细胞做为阳性参照；CD294主要表达在全血中的Th2中，可看一下T细胞是否有分群出现。

2、一般4色的话，你可以做一下CD127和CD294这两个通道的FMO。

niwanmao

z123456 发表于 2023-3-31 23:52
谢谢老师！
对于第二个问题，也就是说，对照只用作两个FMO即可，同型就不用了，是这个意思吗？
另外，我 ...

因为对于你要检测的ILC2，这两个CD分子最重要，并且这两个分子的分群可能没有其它好，更需要做一下FMO。

同型，一般是评估非特异性结合的，如果你检测的样本中，非特异性结合占主要，可以再加上。但实际上，找到与检测分子完全匹配的同型很难，所以在流式专业杂志中，已经用Fc Blocking替代了，只有在非专业杂志中，可能同型仍然是流行的方式。