小鼠外周血裂红

RIVA

王风 发表于 2020-9-8 17:23
哦哦 谢谢倪老师！我下次试试，之前裂红裂不干净，流式好几次都没染上这次染得还行。。但 ...

您手中的溶血素不知道是几倍的，一般市面上的溶血素都是十倍稀释的。如果感觉是溶血素的问题，先用100ul外周血加1ml1乘溶血素，溶血10分钟，试一下。如果溶不干净，很有可能是溶血素的问题。一般小鼠溶血都还好。

RIVA

王风 发表于 2020-9-8 17:23
哦哦 谢谢倪老师！我下次试试，之前裂红裂不干净，流式好几次都没染上这次染得还行。。但 ...

还有一般每管100ul小鼠外周血就够流式检测了，为什么要一次溶1ml呢？而且一般溶1ml外周血的话，是需要10ml 1乘溶血素的，你加的量明显不够。

RIVA

王风 发表于 2020-9-10 16:33
谢谢  我们不是检测小鼠的免疫细胞，是检测回输进去的CART，担心细胞量不够就全部裂解了我们用的就是10* ...

不能高，要1*。你要不再试试。先溶血再染色能节省抗体？这个还是头一次听说。

RIVA

王风 发表于 2020-9-10 16:34
我们一直以来都是先裂红再染色的觉得这样省抗体。。。。

还有需要确认的是，先溶血一定要用不含固定剂的溶血素。