[求助ROS检测]为什么我的阳性对照和空白对照差不多

yxyyjs

首先ROS的阳性比例和平均荧光强度各组都看一下；然后ROS探针孵育、洗脱都结束后，在上机之前，可以试一下样本始终插在冰盒里，虽然说明书上都没有这个么写，但是我自己遇到过常温下十几分钟重复上一次样，ROS水平下降很多，插在冰上，半小时多都信号都不会明显掉下来；最后就是你LPS诱导RAW极化分化是几天，不妨试试6小时之类的时间点后就去测，ROS在LPS作用的当天应该测到明显上升；最后的最后，可以多做几个复孔重复一下，每组留下两三个孔，荧光显微镜下拍个照片看看，佐证一下。

yxyyjs

还有你的RAW264.7本身长得是怎么样啊，是小圆形密集的，还是已经膨大长出两个或更多触角来了，如果对照组已经不是圆圆的小小的，那个这个raw264.7其实就不大适合做极化的实验了，下游很多检测项都不好测出漂亮的结果来

yxyyjs

x5159991 发表于 2023-5-30 11:08
为什么不好做出好看的结果呀，raw应该还挺泛用的，贵组现在用什么细胞替代呢 ...

长角之后，结果总是差点意思，当时是在中科院又先后买过两次新的raw，也在公司买过种子细胞，可能是我们家这边没有掌握好这个细胞的培养细节，总是个把月后就开始长角，然后一个月前的条件给上去，结果重复出来就不咋好，最后关键表型的检测，换成了腹腔巨噬细胞，直接整原代，也挺烦的，很艰辛