求教：为什么要用PMT，直接检测光信号不行吗？

谦手巡梦 · 发表于 2013-6-3 08:47:23

最近学习了流式细胞仪相关知识，有一些疑问，向大家请教：
1.如题，PMT将光信号转换为电信号再进行测量，必须这样吗？直接检测光信号可以吗？还是说现在的技术还达不到直接检测光信号并进行量化的水平？
2.SSC为什么测的是90度角的散射光来反映细胞内部的复杂性？其他角度不可以吗？比如30度、80度？
3.一般来说，SSC的detector在光路中是第一个信号接收器吗？还是说，在不同的仪器光路系统中会有所不同，其位置可能随分光镜、滤光镜的不同组合而变？

谦手巡梦 · 发表于 2013-6-3 12:11:46

谢谢倪老师的回复。

谦手巡梦 · 发表于 2013-6-3 19:56:08

haven_t 发表于 2013-6-3 19:44

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1)现在的仪器无论是检测光、重量、离子强度100%是通过换能器把一种能量转换成电能，即便是你的眼睛和耳朵等 ...

谢谢

谦手巡梦 · 发表于 2013-6-4 08:29:17

gcz5340 发表于 2013-6-3 23:29

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1、PMT除了将光信号转换成电子信号，还有一个就是倍增作用，荧光素就被激光照射几微妙时间，很微弱的荧光需 ...

嗯，了解了，谢谢

第2个问题我也想的是空间设计问题，如果一定要90度角，360度的空间里90度角有好多。再结合倪老师说的，可能是为了和荧光信号汇合到一个通道，这样的话就比较合理了。

谦手巡梦 · 发表于 2013-6-4 16:14:30

niwanmao 发表于 2013-6-4 09:21

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理论基础太扎实了，佩服得五体投地！

确实，应该是瑞利散射，原理如下：

查了一下，散射是指由传播介质的不均匀性引起的光线向四周射去的现象，经激光照射，细胞向空间360 度角的所有方向发射光线。
瑞利散射是大小比光的波长小很多的微粒对入射光的散射，它所遵循的规律是，散射光和入射光波长相同，散射光的强度和入射光波长的4次方成反比。

流式细胞仪检测的散射光属于瑞利散射，它也是向空间360 度角的所有方向发射光线。
我想说的是，SSC选择90度是因为90度角的散射光强度比较大吗？
瑞利散射光的强度和散射方向有什么定量关系吗？这个我没找到相关资料。

谦手巡梦 · 发表于 2013-6-4 19:33:44

gcz5340 发表于 2013-6-4 19:12

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确实有个405 laser，每个公司差别蛮大的。

这个模式图好，光路系统清晰地展示出来，对理论的理解很有帮助

谦手巡梦 · 发表于 2013-6-4 19:35:52

哈哈，点错了吗，怎么会有兔斯基在那儿

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