流式细胞术胞内信号转导检测实例，美图欣赏：）

didi_zhou · 发表于 2013-6-25 22:26:26

50-min （更多散点图及设门请查看附件PDF）：

didi_zhou · 发表于 2013-6-25 22:28:44

60-min （更多散点图及设门请查看附件PDF）：

可以看到整个过程从30分钟以后就结束了，如果是我们用WB做的话这个变化几乎是很难看到的，而使用Flow这个问题就可以解决。

didi_zhou · 发表于 2013-6-25 22:30:17

boiledtea 发表于 2013-6-25 22:13

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楼主是用什么软件做的图？FlowJo么？怎么没见过这种设门方式？貌似很新鲜的样子。。。 ...

Kaluza，雷达图，软件区有下载。30天试用版。

dragonhzqsmmu · 发表于 2013-6-25 22:37:50

这个结果确实漂亮，就是不知道相关的试剂是否都是beckman公司的？单次的费用比Western blot贵不少吧？
不过优点在于节省细胞和快速
这种雷达图是否只有Kaluza软件才能实现？
附件里面的timepoint gate是通过导入多个数据文件实现的，还是连续收集几个样品软件自动分配的

在网上找到相关的说明材料，据该材料所述beckman公司的固定破膜液要优于BD公司的phosflow试剂？

didi_zhou · 发表于 2013-6-25 22:51:37

本帖最后由 didi_zhou 于 2013-6-25 22:54 编辑

dragonhzqsmmu 发表于 2013-6-25 22:37

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这个结果确实漂亮，就是不知道相关的试剂是否都是beckman公司的？单次的费用比Western blot贵不少吧？
不过 ...

都是BC的，BC有专门的试剂及磷酸化抗体。费用来说现在流式抗体应该都不便宜吧，还要考虑抗体的质量。如果跟WB的重复性以及实验所花费的时间来比应该整个价格还是算可以接受的吧。

雷达图现在来说应该只有Kaluza有，可能我接触到的软件还不够多吧，呵呵。

这个结果是通过组合多个FCS文件得到的，也就是Merge得到的。

BC的试剂优点应该是更加柔和能保护细胞，荧光强度会更好、信噪比更高，另外操作步骤少、节约很多时间。

另外你看的是PerFix-P的资料，现在有PerFix-EXPOSE了，效果更好，貌似也更加便宜了。

dragonhzqsmmu · 发表于 2013-6-25 23:47:29

didi_zhou 发表于 2013-6-25 22:51

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都是BC的，BC有专门的试剂及磷酸化抗体。费用来说现在流式抗体应该都不便宜吧，还要考虑抗体的质量。如果 ...

就是这个kit？

didi_zhou · 发表于 2013-6-26 00:02:07

dragonhzqsmmu 发表于 2013-6-25 23:47

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就是这个kit？

嗯，嗯嗯。

tanweifeng · 发表于 2013-6-26 23:15:59

图很炫，感觉LPS刺激后P38和JNK的磷酸化变化大不，ERK的变化比较明显
这个雷达图阅读起来还是不习惯！

didi_zhou · 发表于 2013-6-26 23:19:24

tanweifeng 发表于 2013-6-26 23:15

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图很炫，感觉LPS刺激后P38和JNK的磷酸化变化大不，ERK的变化比较明显
这个雷达图阅读起来还是不习惯！ ...

变化很明显啊，对比1 min、6 min就知道啦。刚好相反。

niwanmao · 发表于 2013-6-26 23:34:55

didi_zhou 发表于 2013-6-26 23:19

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变化很明显啊，对比1 min、6 min就知道啦。刚好相反。

三种磷酸化蛋白在这个坐标轴上呈顺时针旋转，pJNK和p38是呈反向变化的 @tanweifeng

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[图片] 流式细胞术胞内信号转导检测实例，美图欣赏：）