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悬赏1流星未解决
本帖最后由 xlswy1984 于 2014-1-9 16:42 编辑
最近要做从buffy coat里提取单核细胞,做细胞培养,刺激干预后做流式细胞 测一些表面标记,请问大家有没有这方面的经验。
1. buffy coat 提单核细胞,是直接提取完PBMC, 接种培养去除悬浮细胞,还是用MACS的磁珠分选分离出单核细胞后,再接种。哪种比较好呀?有依据不?
2.单核细胞做这个干预刺激后流式细胞,一般是6孔板好,还是12孔板比较好。每孔接种多少细胞比较合适呀?或者说做流式细胞,细胞悬液的密度/总数多少比较合适?打算做6个表面标记的测定,4-6色的流式细胞,基本2个表面标记一个样本管。
PerCP-cy5.5 CD45
PE-cy7 HLA-DR
PB CD14
APC CD16
PE CCR2
FITC CD9
如果再加一个抗体,用什么染料标记的不会和现存的有冲突呢?
我们的机器是BD LSR II,下面是激光参数
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