单染跟双染的凋亡细胞特别少是操作问题还是上机问题，求解答

niwanmao

wmj123456 发表于 2024-1-14 17:34
老师，请问下，如果显微镜下观察到细胞变圆皱缩了，但是流式测的凋亡率只有7%，跟预期的偏低，这种情况可 ...

能否确保染色没问题？

wmj123456

niwanmao 发表于 2024-1-14 20:30
能否确保染色没问题？

倪老师，染色的问题不大，因为其余组的凋亡比例是比较符合预期的。这次又重复了实验，在细胞消化之前，没有洗，流式做的凋亡的比例比上次高了一些。我是觉得上次洗的时候，可能会丢失了一点凋亡的细胞。

wmj123456

niwanmao 发表于 2024-1-14 20:30
能否确保染色没问题？

倪老师，有个疑问，想跟您请教下，外周血裂红后，淋巴单核粒细胞的位置分布，粒细胞和单核细胞，到底哪群细胞在FSC上是靠右一些的？
从直径上或者形态学上看，单核细胞的体积是大于粒细胞的，但是我感觉在做的流式图中，有些时候是粒细胞靠右的，有时候单核细胞靠右。

niwanmao

wmj123456 发表于 2024-1-15 17:46
倪老师，有个疑问，想跟您请教下，外周血裂红后，淋巴单核粒细胞的位置分布，粒细胞和单核细胞，到底哪群 ...

哪群靠右，跟仪器、溶血素都有关的。
Beckman和ACEA的仪器，如果用他们的溶血素，就可以实现FSC从小到大淋巴、单核、中性粒逐步增高的形式
如果不用他们的溶血素，就容易出现单核FSC比中性粒略大的样子

tiger

wmj123456 发表于 2024-1-14 17:34
老师，请问下，如果显微镜下观察到细胞变圆皱缩了，但是流式测的凋亡率只有7%，跟预期的偏低，这种情况可 ...

镜检是为了排除试剂的问题