免疫缺陷鼠外周流式

niwanmao

abbie 发表于 2024-8-9 09:09
老师您好，我重新上传了flowJo的图片，图1是C57，图2是免疫缺陷鼠，图1和图2是同一次跑的结果；图3是与图 ...

从图2的分群看，应该是中性粒细胞发生了比较明显的非特异性染色，可能是凋亡或坏死，是不是样本在外面放置时间较长后才染色的？

abbie

lifeng0711 发表于 2024-8-9 14:49
有个脑洞的想法，会不会是基因缺陷鼠的细胞和正常鼠的细胞区别比较大，用正常鼠调的补偿，不太适合基因缺陷 ...

之前同事做过一批免疫缺陷鼠的图是正常的，也是用C57调的补偿

abbie

毛豆24821 发表于 2024-8-9 15:18
图2的CD3CD19双阳的群SSC很大，不是淋巴细胞。

大部分是位于粒细胞的位置，但粒细胞也不应该是这个形状的

h1030506

我赞同倪老师的意见，从图上可以看出图2的样本处理的不太好，细胞群分群不清晰，是否裂红后上机前样本依旧偏红或者小鼠给药后造成了非特异性的结合。
我看你选择的marker都是淋巴细胞，这种数据不好分析时，你可以选择圈门时单独圈定淋巴细胞群（红色）单核/粒细胞群（黄色），来分析是否是因为其他细胞对结果造成了干扰。

abbie

h1030506 发表于 2024-8-9 17:03
我赞同倪老师的意见，从图上可以看出图2的样本处理的不太好，细胞群分群不清晰，是否裂红后上机前样本依旧 ...

您好，我这是重度免疫缺陷鼠，没有淋巴细胞。您觉得这是裂红的原因吗？

abbie

niwanmao 发表于 2024-8-9 15:30
从图2的分群看，应该是中性粒细胞发生了比较明显的非特异性染色，可能是凋亡或坏死，是不是样本在外面放 ...

老师，样本是新鲜的，您说的中性粒细胞非特异性染色是会发生的对吧，我最近一批重度免疫缺陷小鼠出现了cd3阳性，但cd4和cd8阴性的一群细胞。请问老师，block能否解决这个问题？

niwanmao

abbie 发表于 2024-9-27 20:56
老师，样本是新鲜的，您说的中性粒细胞非特异性染色是会发生的对吧，我最近一批重度免疫缺陷小鼠出现了cd ...

如在淋巴区域，抗原表达符合淋巴细胞，CD3+CD4-CD8-则可认为是DNT或γδT。这是正常，为什么要Block？