测周期时细胞固定问题

feloys · 发表于 2012-2-23 20:23:21

vetzcm 发表于 2012-2-22 17:05

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乙醇固定细胞后，细胞变得很轻，在固定液中倾向于漂浮，离心前往固定液中加点PBS再离心效果会好些 ...

一般第一步离心还能离下来，也能看到有细胞，但第二步PBS洗再离心后就感觉少了很多，有时都看不到

niwanmao · 发表于 2012-2-23 20:39:58

feloys 发表于 2012-2-23 20:23

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一般第一步离心还能离下来，也能看到有细胞，但第二步PBS洗再离心后就感觉少了很多，有时都看不到 ...

你试试先把乙醇固定的细胞转移到流式上样管中，然后再进行洗涤离心，这样或许可以减少细胞损失。
供参考。

vetzcm · 发表于 2012-3-2 16:08:24

feloys 发表于 2012-2-23 20:23

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一般第一步离心还能离下来，也能看到有细胞，但第二步PBS洗再离心后就感觉少了很多，有时都看不到 ...

不需要洗涤细胞离心后，吸干净上清，直接染色，没问题

feloys · 发表于 2012-3-7 15:21:55

vetzcm 发表于 2012-3-2 16:08

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不需要洗涤细胞离心后，吸干净上清，直接染色，没问题

啊，这样也可以？

feloys · 发表于 2012-3-7 15:22:42

vetzcm 发表于 2012-3-2 16:08

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不需要洗涤细胞离心后，吸干净上清，直接染色，没问题

乙醇不会干扰染色吗

niwanmao · 发表于 2012-3-7 15:46:05

feloys 发表于 2012-3-7 15:21

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啊，这样也可以？

估计vectzcm所谓的不需要洗涤是指PI染色之后的洗涤吧？

feloys · 发表于 2012-3-9 14:39:52

niwanmao 发表于 2012-3-7 15:46

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估计vectzcm所谓的不需要洗涤是指PI染色之后的洗涤吧？

不是吧，你再看看他说的……

niwanmao · 发表于 2012-3-9 19:27:42

feloys 发表于 2012-3-9 14:39

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不是吧，你再看看他说的……

哦，是的，仔细看了下，的确，他是指取出标本之后，直接离心去掉乙醇，直接加染液。这个倒是可以的，我试过，关键是乙醇尽可能去干净。

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