同型对照的上机

niwanmao

yoyo13146905 发表于 2012-9-15 12:40

                               
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楼上，我想请教一下，有的机子有三个激光，有不同的通道，请问是不是也用高表达的细胞和不表达的细胞也组成 ...

如果存在不表达该标记的细胞，可以直接用内对照。如果没有，可以用同型对照。

kobe327292007

niwanmao 发表于 2012-9-15 22:24

                               
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如果存在不表达该标记的细胞，可以直接用内对照。如果没有，可以用同型对照。 ...

内对照的意思就是拿抗体染不表达的同种细胞做阴性对照画出marker线，然后测试样品的时候荧光超过marker线即为阳性是么？

niwanmao

kobe327292007 发表于 2013-5-3 20:03

                               
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内对照的意思就是拿抗体染不表达的同种细胞做阴性对照画出marker线，然后测试样品的时候荧光超过marker线 ...

不是。
内对照是指同一个标本内其它正常表达或不表达该类抗原的细胞。举个例子，我们要测急性淋巴细胞白血病原始细胞上CD3的表达，如何确定其阴性界限，就用粒细胞作为阴性界限的设置标准，因为粒细胞肯定不表达CD3，那么如何判断CD3的染色操作没有问题呢？就用患者标本中残留的正常T淋巴细胞，因为它肯定高表达CD3。以上提到的粒细胞和正常T淋巴细胞都属于内对照。所以内对照是一个比较广的概念，除了可用来设置MARKER外，还可确认染色质量。