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楼主: niwanmao

请问用全血和PBMC标Treg在标Foxp3时步骤有什么区别吗?

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发表于 2020-5-7 15:54:19 | 显示全部楼层
小鹿 发表于 2020-5-7 09:56
好的,感谢。还想请教一下测以上三种细胞有用过什么公司的刺激剂效果比较好的吗?。 ...

刺激剂没有对比过,常用的就是EB的和BD的,国产旷博也有,只要的就是佛波酯,离子霉素和莫能霉素,有这三种成分就可以,所以你也可以自己单个买,用DMSO配制使用就行
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发表于 2020-5-7 16:01:41 | 显示全部楼层
小鹿 发表于 2020-5-7 10:05
那老师测这些胞内因子的不用特定破膜的试剂盒,如果只用4%多聚甲醛固定,皂素破膜可不可取呢?如果要测TH ...

倪老师之前发过类似的内容,小鼠和人的CD4会在刺激剂刺激后表达丢失,所以建议使用CD3和CD8反圈;如果想保证实验结果的话,最好TH1/2一管做,TH17另外一管做,因为两者所需的刺激时间不一样,TH1/2一般4-6小时;TH17我们一般刺激12小时再做

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流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2020-5-7 18:35:31 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2020-5-7 14:20
这样做是可以做,但是皂素的浓度比较难摸索,而且需要额外裂红。

好的,谢谢老师。
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