炎性树突状细胞

陈千慧

niwanmao 发表于 2016-11-14 21:45
你这样子不仅管子多，而且CD11c、F4/80每一管都要加，浪费严重。
如果你们的仪器可以做6色，这5个抗体就 ...

老师，我今天问了下，这边的流式仪器可以做6色，那如果我想测炎性树突状细胞的CD11b，FcεRI，Ly6C，CD64，CD206这五个表面标记的话，我应该怎么选荧光标记呢？

niwanmao

陈千慧 发表于 2016-11-15 12:07
老师，我今天问了下，这边的流式仪器可以做6色，那如果我想测炎性树突状细胞的CD11b，FcεRI，Ly6C，CD64 ...

参考你们仪器的滤光片配置（一般仪器自带的说明书会有一些常见荧光写在那里），然后对各个抗体进行荧光搭配，主要原则就是：表达弱的抗原尽量选择亮的荧光素，例如PE、APC等，而表达强的抗原可以选择弱一点的荧光素，例如FITC、PB等。

陈千慧

好的，谢谢老师！

陈千慧

niwanmao 发表于 2016-11-15 12:38
参考你们仪器的滤光片配置（一般仪器自带的说明书会有一些常见荧光写在那里），然后对各个抗体进行荧光搭 ...

老师，这是我们学校流式仪器的滤光片配置：FITC：Filter 530/30；PE-Cy7  780/60；
PerCP-Cy5.5  695/40；APC  660/20；PE   575/26
如果我选择FITC-CD11b、PE-Cy7-FcεRI、PerCP-Cy5.5-Ly6C、APC-CD64、PE-CD206  这样的方案可行吗？

niwanmao

陈千慧 发表于 2016-11-15 16:20
老师，这是我们学校流式仪器的滤光片配置：FITC：Filter 530/30；PE-Cy7  780/60；
PerCP-Cy5.5  695/40 ...

可以的。染色前注意用人IgG或血清阻断一下

陈千慧

niwanmao 发表于 2016-11-15 16:55
可以的。染色前注意用人IgG或血清阻断一下

好的，学到很多，谢谢老师！