CFSE染色后如何用流式分析T细胞增殖

liuruiluna

行棋无悔 发表于 2019-8-7 21:06
您好，请问细胞激活后在显微镜下观察是成团的吗，我原来以为那种成团符起来的细胞是死细胞的 ...

对 激活以后成团的  隔一段时间可以轻轻吹打吹打

南瓜妹妹

13752766846 发表于 2019-5-5 23:04
淋巴细胞刺激活化后CD4会内吞之类的，所以一般用CD8_CD3+来标记

我做的CD3也存在检测不出来的问题

niwanmao

南瓜妹妹 发表于 2020-5-5 21:51
我做的CD3也存在检测不出来的问题

不应该啊，是不是没圈对细胞群？

苏沁沁

niwanmao 发表于 2018-7-3 15:12
1、分离细胞。上机确定空白位置。
2、CFSE染色。上机，同样的电压条件，确定细胞染色情况，是否已染上。
3 ...

倪老师，我们是做淋巴细胞的CFSE，一直不分群，就想用293T和肿瘤细胞做阳性对照看看，但是也不出峰，而且实验管孵育72h后荧光很弱，和空白管一样了。是怎么回事呢？

niwanmao

苏沁沁 发表于 2020-9-1 18:33
倪老师，我们是做淋巴细胞的CFSE，一直不分群，就想用293T和肿瘤细胞做阳性对照看看，但是也不出峰，而且 ...

CFSE没染上的感觉

苏沁沁

niwanmao 发表于 2020-9-2 08:10
CFSE没染上的感觉

是按照1ul对应10^7细胞加的染料，试了两个牌子都没有cfse的群

niwanmao

苏沁沁 发表于 2020-9-2 08:19
是按照1ul对应10^7细胞加的染料，试了两个牌子都没有cfse的群

终浓度多少？

苏沁沁

niwanmao 发表于 2020-9-2 09:11
终浓度多少？

5umol对应10^6或10^7

niwanmao

苏沁沁 发表于 2020-9-2 17:42
5umol对应10^6或10^7

5umol/L？
那样的话，从浓度上，应该是还行的。没染上得找找究竟是浓度计算错误？还是操作时出了什么差错呢？