CFSE脾脏淋巴细胞增殖图，向大家请教

qingshi

看看结果，cona刺激三天。

行棋无悔

immunology 发表于 2019-5-19 15:00
首先没懂楼主的图例到底是什么意思？楼主帖子中说CFSE浓度用了两个分别是2.5uM和5uM，图例上发现CFSE的浓度 ...

你好，我前几天刚刚做了一次CFSE增殖实验，也是做不出来。想请教一下您。您说激活的细胞在显微镜下观察会出现比较明显的细胞团簇，是会浮起来吗？还有显微镜下观察细胞，会影响CFSE荧光吗。

immunology

行棋无悔 发表于 2019-8-7 20:53
你好，我前几天刚刚做了一次CFSE增殖实验，也是做不出来。想请教一下您。您说激活的细胞在显微镜下观察会 ...

我用PHA刺激小鼠脾脏细胞和淋巴结细胞，细胞成团明显，当然做的比较粗，算预实验，也没有预先分选一下。显微镜下确实看到细胞成簇很明显，但是没观察到明显的增殖，并且与CD3和CD28共刺激淋巴细胞的活化有明显的差别，CD3和CD28刺激T细胞以后，细胞会变大很明显，也能看出来明显的增殖，而PHA刺激以后，只是成团成簇，没有观察到明显的增大和分裂增殖情况。不知道您指的漂浮是什么意思？

immunology

qscdawx 发表于 2019-7-18 13:54
之前做过一些人的T细胞增殖实验，效果不错，能看到明显的多次的增殖峰，可能会和小鼠有一些不同，但是可以 ...

请问您，用您这个浓度刺激的话，淋巴细胞多久就会在显微镜下有肉眼可见的反应？24h会有吗？

qscdawx

immunology 发表于 2019-8-31 22:15
请问您，用您这个浓度刺激的话，淋巴细胞多久就会在显微镜下有肉眼可见的反应？24h会有吗？ ...

24H就可以看到明显的细胞变大和成团现象，跟抗体浓度相关。
用CD3/CD28的beads的话效果会更好，但是激活太强的话，背景太高，可能会看不出实验组的区别

immunology

有个问题想向您请教一下，淋巴细胞的96孔板如何换液？淋巴细胞是悬浮细胞，是直接用排枪轻轻吸上清，吸一半加一半么？还是需要离心？

niwanmao

immunology 发表于 2019-9-27 22:58
有个问题想向您请教一下，淋巴细胞的96孔板如何换液？淋巴细胞是悬浮细胞，是直接用排枪轻轻吸上清，吸一半 ...

需要板式离心机

南瓜妹妹

niwanmao 发表于 2019-9-28 15:11
需要板式离心机

倪老师，您好，我想问一下，如果只是单纯看T细胞增殖的情况，画门的时候是要把母代和子代都圈住吗？还是只需要圈子代细胞呢？谢谢！

南瓜妹妹

niwanmao 发表于 2019-9-28 15:11
需要板式离心机

倪老师，您好，我想问一下，如果只是单纯看T细胞增殖的情况，画门的时候是要把母代和子代都圈住吗？还是只需要圈子代细胞呢？谢谢！

niwanmao

南瓜妹妹 发表于 2019-12-26 21:02
倪老师，您好，我想问一下，如果只是单纯看T细胞增殖的情况，画门的时候是要把母代和子代都圈住吗？还是 ...

都要圈的，在Modfit软件里面分析，比较简单，把父代细胞设好，然后再拉好间隔，就自动拟合出来了。