有关标记Treg的FOXP3破膜是否过夜的问题

jus_immo

我做的是小鼠的Treg，一直用的方法是标记抗体之前应用FcR受体阻断剂阻断，表面标记抗体标记完细胞固定，破膜剂用的是皂素，皂素打孔是瞬时的，所以Foxp3标记时是与破膜剂共孵育的，1小时左右，效果不错。抗体用的是ebioscience的，细胞也没刺激过。经验仅供参考，希望有帮助。

chujindong

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这个太神奇了，这不就断了公司的财路了？不知道是否可靠？

汀雅

sugarswallow 发表于 2011-3-20 10:32
估计如果是FOXP3，还是EBIOSCIENCE公司的用得多些，这个时候可以参照sakaguchi(发现Treg细胞的日本人）组发 ...

想请教一下各位老师，我想同时检测人的Th1、Th2、Th17、Treg，需要检测哪些指标呢？第一次做没有经验，还想请教一下做过的老师们哪些厂家的抗体好用呢？

niwanmao

汀雅 发表于 2021-2-23 09:37
想请教一下各位老师，我想同时检测人的Th1、Th2、Th17、Treg，需要检测哪些指标呢？第一次做没有经验，还 ...

已在你的提问帖回答：
Th1、Th2、Th17、Treg胞内因子检测方案
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-8931-1-1.html
(出处: 流式中文网)

wzw_iris

jus_immo 发表于 2011-6-13 10:40
我做的是小鼠的Treg，一直用的方法是标记抗体之前应用FcR受体阻断剂阻断，表面标记抗体标记完细胞固定，破 ...

请问是与固定/破膜剂（fixation/permeabilization）共孵育还是破膜缓冲液（permeabilization buffer）呀？

niwanmao

wzw_iris 发表于 2023-9-5 18:48
请问是与固定/破膜剂（fixation/permeabilization）共孵育还是破膜缓冲液（permeabilization buffer）呀 ...

样本先固定过。后面洗涤后，再与破膜剂（jus_immo 站友用的是比较温和的皂素）共孵育 。

Flow-QD

我做Treg流式的经验：抗体与破膜液的品牌最好是一样的（试过不同来源的，Foxp3的分群非常弱，换成同样品牌的后分群就非常明显）。另外，可以4℃过夜固定，和固定30min的区别不大（但肯定是固定30min最保险）。

wzw_iris

niwanmao 发表于 2023-9-5 21:24
样本先固定过。后面洗涤后，再与破膜剂（jus_immo 站友用的是比较温和的皂素）共孵育 。 ...

好的谢谢