细胞分选

qiulin · 发表于 2011-4-17 14:51:08

分选纯度：纯度与分选前样本的阳性率、仪器分选前的校准有关系；
分选碎片：分选对细胞有一定损伤，难免有碎片，离心、换液可减少，建议待细胞状态稳定后做增殖实验；也可尝试磁珠分选后做CFSE.
分选鞘液：一般是PBS, 过滤下就能用。1X就可以。

zhouyanhong · 发表于 2011-4-18 12:16:09

我们用的是注射用生理盐水

hufan1978 · 发表于 2012-5-7 14:27:01

机器状况OK的情况下，追求纯度，速度慢一点

olivezhou0716 · 发表于 2012-5-8 10:44:41

流式分选的细胞活性是要差些，建议试试MACS磁珠分选，对细胞的伤害性比较小

olivezhou0716 · 发表于 2013-5-7 11:43:24

aninawang 发表于 2011-4-12 21:18

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您好！可否详细介绍下经验？我们用的是PBS。

几个方面：
鞘液肯定会影响细胞的活性；
不同的细胞对于恶劣环境的耐受程度不同；
CFSE实验本身的步骤非常关键，操作细节要注意，对细胞活性和结果可能也会造成影响；
分选纯度不高可能在圈细胞时设门存在一定问题，建议先排除死细胞，避免一些非特异性影响，另外对照也要做好

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