小鼠外周血裂红

RIVA

王风 发表于 2020-9-8 17:23
哦哦 谢谢倪老师！我下次试试，之前裂红裂不干净，流式好几次都没染上这次染得还行。。但 ...

还有一般每管100ul小鼠外周血就够流式检测了，为什么要一次溶1ml呢？而且一般溶1ml外周血的话，是需要10ml 1乘溶血素的，你加的量明显不够。

王风

RIVA 发表于 2020-9-9 08:52
还有一般每管100ul小鼠外周血就够流式检测了，为什么要一次溶1ml呢？而且一般溶1ml外周血的话，是需要10ml ...

谢谢  我们不是检测小鼠的免疫细胞，是检测回输进去的CART，担心细胞量不够就全部裂解了我们用的就是10*的，而且是1:7稀释的，比例比1*的还高一些。

王风

niwanmao 发表于 2020-9-9 07:50
你下次也可以先进行裂解，用500ul外周血+5ml稀释后的裂解液。如果还不行，尝试自己配制氯化铵裂解液（站 ...

我们一直以来都是先裂红再染色的觉得这样省抗体。。。。

RIVA

王风 发表于 2020-9-10 16:33
谢谢  我们不是检测小鼠的免疫细胞，是检测回输进去的CART，担心细胞量不够就全部裂解了我们用的就是10* ...

不能高，要1*。你要不再试试。先溶血再染色能节省抗体？这个还是头一次听说。

RIVA

王风 发表于 2020-9-10 16:34
我们一直以来都是先裂红再染色的觉得这样省抗体。。。。

还有需要确认的是，先溶血一定要用不含固定剂的溶血素。

王风

RIVA 发表于 2020-9-10 16:56
还有需要确认的是，先溶血一定要用不含固定剂的溶血素。

嗯嗯。。。谢谢，请教下EDTA二钠算不算固定剂类型的？论坛里面的配方中有这个

niwanmao

王风 发表于 2020-9-11 13:34
嗯嗯。。。谢谢，请教下EDTA二钠算不算固定剂类型的？论坛里面的配方中有这个 ...

EDTA不是固定剂。