为什么我的活细胞数量真么少……

hufan1978 · 发表于 2011-4-21 17:07:26

这个要做一个空白对照
就是什么试剂都不加，光细胞上机测一下，把那群放在左下象限。然后再看实验组样品怎么样。
凋亡试剂不能多加，一般都是5微升，对应10^6细胞，如果细胞数不够，试剂也少加点，以免“过染”
培养的贴壁细胞消化尽量快一点，最好从培养箱拿出来到上机检测，一小时之内。

toby3003 · 发表于 2011-4-23 08:36:52

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版主，在凋亡实验中收集多少细胞是合适呢？

toby3003 · 发表于 2011-4-23 08:42:46

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请教一下，在读数据的时候是读%gated 还是 &total？

toby3003 · 发表于 2011-4-23 09:01:35

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感谢，感谢:) 现在有一个情况，就是我的细胞超级多，能有4*10^6 ，这种情况下我的染剂要多少好呢，还是我应该稀释一下细胞？在细胞收集的时候3，4秒就好了，我一直在考虑是不是这个原因我的凋亡做的一直不好？（我上传的细胞就是同时做的，就细胞数不一样，但是图形不一样，很郁闷）

niwanmao · 发表于 2011-4-23 09:09:12

toby3003 发表于 2011-4-23 08:36

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版主，在凋亡实验中收集多少细胞是合适呢？

一般收集1万个，必要时可以增加收集数量。

niwanmao · 发表于 2011-4-23 09:10:33

toby3003 发表于 2011-4-23 08:42

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请教一下，在读数据的时候是读%gated 还是 &total？

如果碎片和干扰信号比例很低，可以直接用％TOTAL，一般来说，我们大多会设置一个R1来圈中我们需要的细胞，排除掉碎片等信号，所以一般用％GATED。

niwanmao · 发表于 2011-4-23 09:14:48

toby3003 发表于 2011-4-23 09:01

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感谢，感谢现在有一个情况，就是我的细胞超级多，能有4*10^6 ，这种情况下我的 ...

细胞数量控制在每管1×10⁵，细胞密度控制在1×10⁶/ml，所以相当于你先得把标本稀释到1×10⁶/ml，然后再取100微升进行处理。

toby3003 · 发表于 2011-4-23 09:17:10

本帖最后由 toby3003 于 2011-4-23 09:24 编辑

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版主，能不能帮我看看，我的细胞周期图？

niwanmao · 发表于 2011-4-23 21:10:23

toby3003 发表于 2011-4-23 09:17

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版主，能不能帮我看看，我的细胞周期图？

哪个细胞周期图？

tulipsea · 发表于 2011-6-16 18:04:56

这电压也忒高了

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[凋亡检测] 为什么我的活细胞数量真么少……