检测凋亡细胞内ROS的含量

maple032023

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用带血清的培养基清洗?我怎么看的都是不带血清的培养基清洗啊?然后探针也是溶解在不带血清的培养基里加载的.

stef1981

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探针是溶在不带血清的培养基里，清洗的时候带血清可能更能保护细胞吧，个人理解

a2782953

maple032023 发表于 2011-10-14 16:48

                               
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用带血清的培养基清洗?我怎么看的都是不带血清的培养基清洗啊?然后探针也是溶解在不 ...

我自己做的时候感觉不清洗的话，至少在荧光显微镜下背景是很重的。。可能在流式细胞仪上就不会那么明显了。

mtang

同意楼上的，需要预热的PBS或者不含酚红的培基清洗。 还需要几种对照，去除背景。

vetzcm

不知道大家做ROS时，考虑到消化细胞后，在PBS中孵育30分钟，会不会造成细胞的呼吸爆发啊，也许不是药物刺激所导致的呢。。。疑惑中

niwanmao

vetzcm 发表于 2013-8-14 10:48

                               
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不知道大家做ROS时，考虑到消化细胞后，在PBS中孵育30分钟，会不会造成细胞的呼吸爆发啊，也许不是药物刺激 ...

这个应该不会吧。不刺激就自动会呼吸爆发？

vetzcm

niwanmao 发表于 2013-8-14 10:56

                               
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这个应该不会吧。不刺激就自动会呼吸爆发？

我觉得是细胞所处外环境不利于自身生长，不像再培养箱中有5%CO2，空气中氧气含量高，所以发生氧化应激什么的 猜想的 就是我发现做ROS孵育细胞，和处理过程都在室温会有好的结果，处理时放冰上就不太好...呵呵

niwanmao

vetzcm 发表于 2013-8-14 10:59
我觉得是细胞所处外环境不利于自身生长，不像再培养箱中有5%CO2，空气中氧气含量高，所以发生氧化应激什 ...

氧化应激肯定会有，但是肯定是维持在正常水平。