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调整染色顺序可提高单核细胞CCR2和CX3CR1的表达水平

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发表于 2013-2-25 12:45:56 | 显示全部楼层 |阅读模式

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标题字数有限,无法准确表达原意,本意应为:用多色流式同时检测CCR5、CCR2和CX3CR1时,由于CCR5会干扰后两者的检测,使后两个趋化因子的表达水平降低,但通过调整染色顺序,即先染CCR2和CX3CR1,再染CCR5,会使CCR2和CX3CR1的表达水平恢复到正常。
趋化因子及其受体在免疫系统的细胞迁移中起着重要作用,而细胞之间的作用是一个复杂的网络,因此,同时检测单细胞表面多个趋化因子的表达,可更好的反映该网络的本质。然而,趋化因子即使未结合配体也会发生一定程度的内化、胞内运输、循环回胞膜等过程,因此,要做到准确检测趋化因子很困难。本文作者检测了单核细胞表面的三种趋化因子CCR2、CX3CR1和CCR5,发现CCR2、CX3CR1单标时表达水平高于与CCR5同时标记时的水平,再通过FMO对照,发现CCR5可干扰CCR2、CX3CR1的检测。通过调整染色顺序,可使CCR2、CX3CR1的检测结果恢复到单标时的水平。

原文PDF:
Cytometry Pt A - 2013 - Jalbert - Sequential staining improves detection of CCR2.pdf (451.48 KB, 下载次数: 12)

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发表于 2022-8-19 15:05:31 | 显示全部楼层
老师您好,我检测的是CD8 T细胞上CX3CR1的表达,但是几次上机检测下来发现表达很不稳定, 有两次能看到表达,但是大部分情况几乎看不到CX3CR1表达。如果我先染CX3CR1,再染其他的,情况会有改善吗?谢谢老师
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发表于 2022-8-19 15:15:56 | 显示全部楼层
我做的是HIV感染者外周血,单染管发现刺激能使CX3CR1的表达降低,但是全染的时候却发现刺激的全染管CX3CR1的表达竟然比不刺激的好,但是又不是全部刺激的全染管都表达,所以就不知道什么原因
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