流式染色降低背景染色的方法？

xiaoguo521521

niwanmao 发表于 2020-1-21 22:06
固定和破膜造成的背景高，目前是无法解决的，因为这主要是由于固定和破膜之后，细胞的形状、膜结构发生了 ...

在对细胞因子和其他细胞质和/或细胞核抗原进行细胞内染色之前，使用 Permeabilization Buffer (10X) 和 Intracellular (IC) Fixation Buffer（目录00-8222）或 Foxp3/Transcription Factor Fixation/Permeabilization Concentrate and Diluent（目录00-5521）可固定细胞并破膜。这些试剂经过专门配方设计，可降低荧光染料标记抗体的非特异性染色并提高荧光信噪比

倪老师 这是eb的固定破膜剂产品介绍  他们专门把能降低背景荧光强度列出一个卖点 这个我们自己配制固定破膜剂是没办法解决背景荧光强度的 但是好多文献上用到皂素破膜，但是效果有的还可以 按照他们配方配后效果不怎么好 这种文献可信度高吗

niwanmao

xiaoguo521521 发表于 2020-2-24 11:57
在对细胞因子和其他细胞质和/或细胞核抗原进行细胞内染色之前，使用 Permeabilization Buffer (10X) 和 I ...

也明显的，宣传归宣传，实测和表面染色对比还是明显的。

tiger

xiaoguo521521 发表于 2020-2-24 11:57
在对细胞因子和其他细胞质和/或细胞核抗原进行细胞内染色之前，使用 Permeabilization Buffer (10X) 和 I ...

皂素浓度太低破膜不彻底，浓度太高背景又太高。建议你选择一下合适的浓度。

xiaoguo521521

tiger 发表于 2020-2-25 15:31
皂素浓度太低破膜不彻底，浓度太高背景又太高。建议你选择一下合适的浓度。 ...

是的，不同厂家和不同来源的皂素差别很大的

xiaoguo521521

niwanmao 发表于 2020-2-24 16:36
也明显的，宣传归宣传，实测和表面染色对比还是明显的。

恩恩  国外产品太贵 国内也没有做的好的

xiaoguo521521

tiger 发表于 2020-2-25 15:31
皂素浓度太低破膜不彻底，浓度太高背景又太高。建议你选择一下合适的浓度。 ...

麻烦问下你用过哪个厂家的皂素较好呢？

tiger

xiaoguo521521 发表于 2020-2-28 13:54
麻烦问下你用过哪个厂家的皂素较好呢？

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