求助流式图分析

令狐武玲

各位老师：       您们好。我从外周血提取单核细胞，贴壁分离淋巴细胞后加细胞因子诱导5天，PE-anti-CD83，结果如图所示，请问为什么会出现这么多群细胞，是杂质细胞太多提纯有误？各细胞群都是什么细胞？
       谢谢！

家的感觉

niwanmao 发表于 2015-6-3 17:49
那些标本用正常人还是病人都可以，补偿管尽量用阳性表达该标记的标本，例如病人标本表达CDxx，那么就用病 ...

谢谢倪老师！

niwanmao

家的感觉 发表于 2015-6-3 17:45
不是的，主要是流式的管理，有一些老师和学生做一些病人的样本，有时实验分组有正常人、病人、治疗组等， ...

那些标本用正常人还是病人都可以，补偿管尽量用阳性表达该标记的标本，例如病人标本表达CDxx，那么就用病人标本。

家的感觉

niwanmao 发表于 2015-6-3 17:42
你不是做白血病免疫分型 ？

不是的，主要是流式的管理，有一些老师和学生做一些病人的样本，有时实验分组有正常人、病人、治疗组等，就说像这样的一般设置同型对照和补偿管时，用的时正常人的还是病人的？

niwanmao

家的感觉 发表于 2015-6-3 17:40
倪老师说的这个不大懂……

你不是做白血病免疫分型 ？

家的感觉

niwanmao 发表于 2015-6-3 17:36
临床免疫分型都是用标本内残存的正常细胞作为内对照，所以必须要了解正常各系细胞的分化规律。 ...

倪老师说的这个不大懂……

niwanmao

家的感觉 发表于 2015-6-3 17:28
倪老师，问一个疑惑的问题，对于正常人、病人的样本检测，对照管和各个单阳补偿管用的细胞是正常人的是吗 ...

临床免疫分型都是用标本内残存的正常细胞作为内对照，所以必须要了解正常各系细胞的分化规律。

家的感觉

niwanmao 发表于 2015-6-3 12:20
反设门就是指圈中阳性分群比较好的、标记表达特异性好的那群细胞（例如你圈CD80阳性的DC细胞），然后在FS ...

倪老师，问一个疑惑的问题，对于正常人、病人的样本检测，对照管和各个单阳补偿管用的细胞是正常人的是吗？

令狐武玲

niwanmao 发表于 2015-6-3 12:20
反设门就是指圈中阳性分群比较好的、标记表达特异性好的那群细胞（例如你圈CD80阳性的DC细胞），然后在FS ...

您的意思是附图中：先圈中P2（假定认为它是CD83阳性DC），然后再把它显示在FSC/SCC图中，对照P1就知道dc在哪群了吗？

niwanmao

令狐武玲 发表于 2015-6-3 11:18
倪老师，反圈门是什么意思？怎么做到的？我是初学者，别见怪~

反设门就是指圈中阳性分群比较好的、标记表达特异性好的那群细胞（例如你圈CD80阳性的DC细胞），然后在FSC/SSC散点图上看它在哪个位置，说明那群细胞可能就是。

令狐武玲

niwanmao 发表于 2015-6-3 11:14
也不一定，也有可能混在粒细胞和死细胞之间的区域（没圈），你可以用DC特异性标记反圈门看看。 ...

倪老师，反圈门是什么意思？怎么做到的？我是初学者，别见怪~