找回密码
 加入流式中文网

QQ登录

只需一步,快速开始

流式中文网 门户 查看主题

一图汇总:为什么要用Fc阻断剂?用什么?如何用?

发布者: niwanmao | 发布时间: 2020-2-25 16:12| 查看数: 1808| 评论数: 0|帖子模式

亲爱的FLOWER,加入流式中文网,一起讨论,一起学习,享受更多福利吧!

您需要 登录 才可以下载或查看,没有账号?加入流式中文网

×
尽管之前发过不少关于Fc阻断重要性的帖子(流式中文网论坛搜索“阻断”即可),内容基本上都讲的比较清楚了。但是人嘛,还是想越简洁越好。

下面这张图转自fccf.mskcc.org,虽然也有较多文字,但相对简单明了的排版比较适合快速了解。
简单概括一下:
Fab端结合抗原,用于检测的,但由于抗体是Y形的,所以还有个Fc端,会与细胞表面的Fc受体发生非特异性染色,导致假阳性。
非特异性染色的细胞很多,包括B细胞、DC、单核、巨噬、NK、中性粒、嗜酸粒、血小板、肥大、嗜碱等细胞。
Fc Blocking就是为了避免这种情况的。
Fc阻断剂的种类这幅图里面介绍的不够详细,一般证实以下三种比较好(主要是针对人或小鼠的样本,其它物种需要对应的种属):
(1)商品化的Fc Block(25ug/ml或10ug/ml);
(2)2.5%或10%的人血清或小鼠血清;
(3)100ug/ml的人IgG。

Fc.jpeg

最新评论

毛豆24821 发表于 2020-12-9 09:56:22
有个问题,细胞是猴子PBMC,使用的Human FC block中是包括了Human IgG的,现在很多一抗是全人源化的抗体,所以如果二抗是anti-human IgG Fc,那这时候应该用什么来block。猴血清跟anti-human IgG Fc也会有结合的。
或者这种情况可以不做Block吗?
毛豆24821 发表于 2020-12-9 10:02:23
有个问题,细胞是猴PBMC,使用的Human Fc block中包含了Human IgG,现在很多一抗是全人源化的抗体,接着用荧光标记anti-human IgG Fc作为二抗。 这种时候二抗会与Fc block结合,产生假阳性。
请问这种时候应该选择什么来作为block,另外猴血清也会与二抗有结合。或者这种情况是否可以不做block?
毛豆24821 发表于 2020-12-9 10:03:02
有个问题,细胞是猴PBMC,使用的Human Fc block中包含了Human IgG,现在很多一抗是全人源化的抗体,接着用荧光标记anti-human IgG Fc作为二抗。 这种时候二抗会与Fc block结合,产生假阳性。
请问这种时候应该选择什么来作为block,另外猴血清也会与二抗有结合。或者这种情况是否可以不做block?
jnutsq 发表于 2021-4-22 09:28:24
倪老师,2.5%和10%,请问为什么差别很大。我是做人的全血。谢谢!
jnutsq 发表于 2021-4-23 09:01:48
倪老师,请问应该是用2.5%还是10%的浓度呢?每个加多少μL呢?人的全血样本。谢谢!

手机版|流式中文网 ( 浙ICP备17054466号-2|浙ICP备17054466号-2 )

浙公网安备 33038202004217号

GMT+8, 2024-4-26 23:31

Powered by Discuz! X3.5

© 2001-2024 Discuz! Team.

快速回复 返回顶部 返回列表