求MOUSE外周血溶血方法

laikete

niwanmao 发表于 2012-10-25 19:58

                               
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不会吧？从原理上说水属于低渗裂解，但似乎没看到过哪篇文章用过这方法吧 ...

我们都是用这种方法，裂解效果非常好，淋巴细胞，单核细胞，粒细胞分的特别清楚，主要是我们免疫学小鼠方面的文章放外周血的图很少

niwanmao

laikete 发表于 2012-10-26 11:00

                               
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我们都是用这种方法，裂解效果非常好，淋巴细胞，单核细胞，粒细胞分的特别清楚，主要是我们免疫学小鼠方 ...

是直接用蒸馏水处理10－15分钟吗？多少量？

laikete

niwanmao 发表于 2012-10-26 12:09

                               
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是直接用蒸馏水处理10－15分钟吗？多少量？

我们一般是这样：
外周血肝素抗凝100-200ul置冰上，另预先准备好9ml预冷的蒸馏水（15ml管中）
将血加入到9ml水中吹打约20-30sec（根据血量多少）
30sec后加入1ml 10*PBS终止反应
1700rpm 离心5min，倒掉上清，拿缓冲液（如PBSA）重悬沉淀即可分管染色上机

niwanmao

laikete 发表于 2012-10-26 14:34

                               
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我们一般是这样：
外周血肝素抗凝100-200ul置冰上，另预先准备好9ml预冷的蒸馏水（15ml管中）
将血加入到 ...

这种做法让我想起染色体标本处理之前的计数，一般用2—4%的冰醋酸裂解红细胞，获得较纯的白细胞进行计数。
也有用冰醋酸和甲醇1:3混合。