细胞增殖活性的检测（SPF比例分析法）

niwanmao

virginforest 发表于 2012-5-18 12:02

                               
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3个原始文件，白念球菌可能不是严格的2到4倍体复制的关系，感觉复制很乱
...

真菌我也确实是第一次分析，我仔细观察了很长时间，发现用一个倍体去衡量很难分析，而且RCS会很大。

于是我把FL2-W/FL2-A的设门图全圈进去，在8号标本那里就能够发现应该存在两个倍体或3个倍体，因为我对你们的研究不是很了解，所以就暂时使用2个倍体来分析，发现RCS还是不错的，除了7号标本略大于5，其它标本都<5，说明能够反映真实数据。

图片如下：

7

8

9

virginforest

倪老师，多谢您的分析，这么处理数据好了很多。化腐朽为神奇   之前我还觉得是样品处理的问题呢，白念有细胞壁，我一直都以为可能是这个的影响呢。

niwanmao

virginforest 发表于 2012-5-18 22:40

                               
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倪老师，多谢您的分析，这么处理数据好了很多。化腐朽为神奇   之前我还觉得是样品处理的问题呢，白念有 ...

你用在真菌的处理步骤和我网站上提供的protocol一样吗？了解一下

http://www.flowcyto.cn/bbs/forum ... %3D35%26typeid%3D35

virginforest

倪老师，好！ 步骤一样啦，只不过我用的是 凯基的周期试剂盒， 离心一般是1000rpm，每次也不怎么计数细胞，凭感觉的

niwanmao

virginforest 发表于 2012-5-22 16:35

                               
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倪老师，好！ 步骤一样啦，只不过我用的是 凯基的周期试剂盒， 离心一般是1000rpm，每次也不怎么计数细胞， ...

真菌也能计数？

virginforest

niwanmao 发表于 2012-5-22 19:38

                               
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真菌也能计数？

能计数啊，用血细胞计数板，真菌5um大小吧，反正能看见

niwanmao

virginforest 发表于 2012-5-23 10:05

                               
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能计数啊，用血细胞计数板，真菌5um大小吧，反正能看见

哇塞，厉害的。学习了。

virginforest

倪老师 ，问个问题 ， 我用modfit 处理数据，峰不很明显时怎么去划G1，s，G2，那个mark可以随便移动，这样主观影响因素太大了。比如上面请您分析的那个白念的图， 我也试了一下， mod选项里选择numble of cycle =2 ，一下子出来 G1，S，G2，an1G1，。。。。 都缩在左边角落，我怎么去划分每个期呢？

niwanmao

virginforest 发表于 2012-5-23 10:39

                               
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倪老师 ，问个问题 ， 我用modfit 处理数据，峰不很明显时怎么去划G1，s，G2，那个mark可以随便移动，这样 ...

我个人的体会大致如下，供参考：
首先，划分几个周期，需要你对标本了解。
其次，正常二倍体的位置一定要清楚，最好是有标准参照物做对照。
最后，G0/G1峰基本上都很明显，确定好这个峰的位置之后，再把G2峰的位置定在相当于G1峰2倍的位置，软件即会自拟合。

virginforest

niwanmao 发表于 2012-5-23 12:17

                               
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我个人的体会大致如下，供参考：
首先，划分几个周期，需要你对标本了解。
其次，正常二倍体的位置一定要 ...

多谢指导，这个“再把G2峰的位置定在相当于G1峰2倍的位置” 是不是大概差不多就可以啊，我有时候G1，G2位置按照2倍关系放好，但是Fit一下，软件就完全找不着北了，出来个乱七八糟的