关于检测PBMCs中NK细胞的抗体选择？

kobe327292007

dragonhzqsmmu 发表于 2013-6-13 21:10

                               
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我想用不同的荧光标记CD56和CD16，做做NK细胞的亚群看看，CD56用的是PE，CD16用的是APC，还没有试 ...

哦，那行啊，等你结果出来我也学习一下

dragonhzqsmmu

哪里了，向您多学习学习了
没办法我们的是BD的Calibur撑死了四色，现在还对多色补偿比较慌

kobe327292007

dragonhzqsmmu 发表于 2013-6-13 21:35

                               
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哪里了，向您多学习学习了
没办法我们的是BD的Calibur撑死了四色，现在还对多色补偿比较慌 ...

我没做过多色，根本看不懂，正在学习呢，一团浆糊啊。

niwanmao

kobe327292007 发表于 2013-6-14 08:19

                               
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我没做过多色，根本看不懂，正在学习呢，一团浆糊啊。

你前面那个不是做得很好吗？

kobe327292007

niwanmao 发表于 2013-6-14 09:04

                               
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你前面那个不是做得很好吗？

老师，跟你看张图，你分析下咋回事啊？

1.用PBMCs不加抗体作为空白对照。
2.用PBMCs加FITC-CD3做补偿
3.用PBMCs加PE-CD56做补偿
4.用PBMCs加FITC-CD3/PE-CD(16+56) cocktail。
下面是加FITC-CD3/PE-CD(16+56) cocktail测得的样品的图，左上角特别靠上，很难看，是为什么呀？该如何调？

niwanmao

kobe327292007 发表于 2013-6-15 14:37

                               
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老师，跟你看张图，你分析下咋回事啊？

1.用PBMCs不加抗体作为空白对照。

这是CD56/CD16 PE的荧光强度过高，超出软件检测范围，这从抗体质量方面来说是好事，其实分析上是没问题的，因为软件会把跑到外面的细胞计算进去，但如果为了美观起见，可以在加抗体时减量试试（切记，要比较全量和减量后比例是否有改变）。

kobe327292007

niwanmao 发表于 2013-6-15 22:37

                               
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这是CD56/CD16 PE的荧光强度过高，超出软件检测范围，这从抗体质量方面来说是好事，其实分析上是没问题的 ...

那看起来不是我的PE-CD56快不行了，就是cocktail里面的PE-CD56/CD16抗体更好，不过不管怎么样，都是好事是吧？

niwanmao

kobe327292007 发表于 2013-6-16 07:48

                               
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那看起来不是我的PE-CD56快不行了，就是cocktail里面的PE-CD56/CD16抗体更好，不过不管怎么样，都是好事 ...

是效价太好了