请问ROS结果如何分析

sherry123 · 发表于 2013-8-29 13:45:54

好的，我来试试用FL-1/SSC显示，谢谢您的解答！

leosurely · 发表于 2013-9-4 15:55:58

niwanmao 发表于 2013-7-15 12:55

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最好设门看表达率，原则上如果能够用百分比比较，最好用百分比。

ROS的结果应该不能看百分比吧，活性氧的产生应该是所有细胞都参与的一个过程，只是处理因素的不同会影响活性氧产生的程度，所以我认为还是应该看全体的细胞的平均荧光强度。至于产生双峰，还是要从制样上找原因，染色过程要充分混匀（5分钟混匀一次），细胞状态也很重要，在FSC-SSC上可以看到靠角落的细胞往往是荧光强度低的细胞。

sherry123 · 发表于 2013-9-9 14:06:05

您好！关于ROS的双峰，我实验重复了多次，发现如果检测及时，在处理好样本半小时内检测，容易出现双峰，且是连续不间断的双峰；但如果上流式细胞仪的时间推迟，就会是单峰，所以我疑惑是不是ROS出现单双峰的原因与距离检测的时间长短有关。
另外，如果用双峰图分析，请问能否划个二分门后取M2的平均荧光强度？如果可以，是用Mean、Geomean还是Medium?

niwanmao · 发表于 2013-9-9 17:13:50

sherry123 发表于 2013-9-9 14:06

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您好！关于ROS的双峰，我实验重复了多次，发现如果检测及时，在处理好样本半小时内检测，容易出现双峰，且 ...

前面不是说过了吗，用横坐标ROS、纵坐标SSC的图来划阳性细胞群，然后分析其百分比或GEOMEAN。

sherry123 · 发表于 2013-9-10 09:21:56

老师，我也看到了您在“平均荧光强度”中的解答：“用百分比还是荧光强度来表示结果，需要看你的研究目的和研究指标的表达差异度，如果两个标本均高表达或弱表达，仅在强度上有差异，这时百分比就体现不出它们之间的差异，可采用平均荧光强度来表达它们之间的差异；如果一个标本高表达，一个标本弱表达，那么这时可以采用百分比（当然，平均荧光强度也是可以）”
现在明白了，您说"用横坐标ROS、纵坐标SSC的图来划阳性细胞群"，是因为ROS-SSC的散点图与ROS-COUNT的柱状图相比，阴性与阳性细胞群分群更加明显；关于“百分比或GEOMEAN”如何选择，可以参考您上述的在这一段话。对吧？
您是这里负责解答问题的主要老师，谢谢您的解惑，向您多学习，祝您教师节快乐！

niwanmao · 发表于 2013-9-10 09:32:43

sherry123 发表于 2013-9-10 09:21

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老师，我也看到了您在“平均荧光强度”中的解答：“用百分比还是荧光强度来表示结果，需要看你的研究目 ...

很棒。理解正确：）

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