为何同型对照管表达阳性？

niwanmao

一丁点儿 发表于 2013-12-1 23:50

                               
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是啊，这样的事情确实蹊跷。每次的操作步骤都是一样的，试剂也是同一管抗体，破膜剂也都是破膜前半个小时 ...

你做完之后，把原始数据文件传上来给我们，我们用软件分析看看，或许能找到问题所在

一丁点儿

niwanmao 发表于 2013-12-2 08:19

                               
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你做完之后，把原始数据文件传上来给我们，我们用软件分析看看，或许能找到问题所在 ...

今天又做了一个自己的血试试，和第一次做自己的血的结果也完全不同，今天的foxp3对照依旧阳性，但是后来老师通过调PE-CY7的电压把细胞群限制在了左下角，但是，测定管没调电压，细胞群的分布就没有很大的偏离。唉，真的是不知道原因何在了。附几张原始文件，前两张是最开始做的自己的血标本，那个时候没有出现FOXP3的对照阳性。中间两张是上次出现的对照阳性，其中前一张是对照管，后一张是测定管。最后两张是今天做的自己的血标本，前一张是将PE-CY7电压从600多调到500多之后的结果，后一张是没调整电压的结果。

一丁点儿

原始文件格式不支持？？传不了原始文件

一丁点儿

niwanmao 发表于 2013-12-2 08:19

                               
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你做完之后，把原始数据文件传上来给我们，我们用软件分析看看，或许能找到问题所在 ...

悲催，不论是选择上传图片还是选择上传附件，都不能上传我的原始文件这是为什么啊？

niwanmao

一丁点儿 发表于 2013-12-2 20:21

                               
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悲催，不论是选择上传图片还是选择上传附件，都不能上传我的原始文件这是为什么啊？ ...

你要把FCS文件压缩到ZIP或RAR压缩包再上传。

一丁点儿

niwanmao 发表于 2013-12-2 08:19
你做完之后，把原始数据文件传上来给我们，我们用软件分析看看，或许能找到问题所在 ...

老师，数据已经传上去了，麻烦老师您给看看问题可能是什么原因，谢谢！另外，今天又做了下试验，发现不知道是不是补偿有问题。。。

niwanmao

一丁点儿 发表于 2013-12-10 00:28
老师，数据已经传上去了，麻烦老师您给看看问题可能是什么原因，谢谢！另外，今天又做了下试验，发现不知 ...

好的，现在在忙着临床数据的分析，晚上帮你看看。

niwanmao

一丁点儿 发表于 2013-12-10 00:28
老师，数据已经传上去了，麻烦老师您给看看问题可能是什么原因，谢谢！另外，今天又做了下试验，发现不知 ...

看了下，你11月29日同型对照和标本FOXP3通道的荧光均明显偏高，而且那次细胞也明显偏少，所以不知道是不是你的细胞状态不好？或者机器堵造成你细胞获取过少？洗涤的次数够么？
但再看12月2日的，发现结果就很好，补偿也好的。12月2日，同型对照

12月2日，同型对照

12月2日，标本

12月2日，标本

一丁点儿

niwanmao 发表于 2013-12-10 20:45
看了下，你11月29日同型对照和标本FOXP3通道的荧光均明显偏高，而且那次细胞也明显偏少，所以不知道是不 ...

非常感谢老师您的帮助，11月29日那天检测的时候，一开始上机发现对照的PE-CY7阳性，比测定的荧光强度明显偏高，就进行了机器的清洗和质控，后来上机还是没有改变，再经过大清洗，检查结果就是我传上给您看的那个，那天折腾了好多次，最后细胞也所剩无几了。但是却找不到出现这样情况的原因，后来12月2号又抽了自己的血去做，发现又没有这样的问题了。。。所以，甚是莫名其妙。。。

niwanmao

一丁点儿 发表于 2013-12-10 21:41
非常感谢老师您的帮助，11月29日那天检测的时候，一开始上机发现对照的PE-CY7阳性，比测定的荧光强度明显 ...

如果你确定你的操作都是一模一样，我觉得也只能认为是仪器的管路问题，可能是比较，也可能是流动室问题。