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楼主: 一丁点儿

[淋巴细胞相关] 为何同型对照管表达阳性?

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发表于 2013-12-14 11:17:36 | 显示全部楼层
楼主的问题我也出现过多次,被其困扰了很长时间。胞内染色确实稳定性很差,最后只能选择可信的同型对照结果,出现阳性的同型对照结果弃用。也跟技术支持沟通过,无解,他们只说胞内染色不稳定什么的。后悔,该用CD127的。
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 楼主| 发表于 2013-12-14 12:50:36 | 显示全部楼层
gjy5386 发表于 2013-12-14 11:17
楼主的问题我也出现过多次,被其困扰了很长时间。胞内染色确实稳定性很差,最后只能选择可信的同型对照结果 ...

实验总是有各种问题出现。。。和技术支持沟通各种问题,虽给了回复,但是貌似都不足以说服,因为最终问题都没有得到解决。。。一开始也想做CD127,做起来省太多功夫了。只是,貌似人家都说FOXP3最经典。。。
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发表于 2013-12-14 15:52:57 | 显示全部楼层
一丁点儿 发表于 2013-12-13 23:13
谢谢老师的回复,那我还想问问你说的不同类型的标本,不同种细胞株算不同类型标本,那对于不同的白血病患 ...

按照我的理解,不同细胞株算不同类型,因为长期的培养,对于它们的性质影响很大。
而对于患者,如果都是骨髓来源,那么即使疾病不同,还是认为同种标本。

当然,临床上某些疾病(如M3)细胞内颗粒较大,可能会造成非特异性荧光增强,此时设门位置可能需要稍微变动,但电压和补偿仍是不应该动的。

总之,不管标本类型是否变动,建议电压和补偿能不动尽量不动,即使要微调也建议让有经验的朋友来调。
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发表于 2013-12-14 15:53:56 | 显示全部楼层
一丁点儿 发表于 2013-12-14 12:50
实验总是有各种问题出现。。。和技术支持沟通各种问题,虽给了回复,但是貌似都不足以说服,因为最终问题 ...

如果发科研类文章,还是建议用foxP3更好一点,当然,也不是说CD127就不能发表。
在临床上的检测,还是CD127更高效一些。
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 楼主| 发表于 2013-12-14 21:44:41 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2013-12-14 15:52
按照我的理解,不同细胞株算不同类型,因为长期的培养,对于它们的性质影响很大。
而对于患者,如果都是 ...

哦,谢谢老师!可是,老师,我还想请教下。。。。
有的时候对照管的阴性群就到了大概10的三次方的位置,这种情况下您是否会考虑调下电压呢?您说的非特异性荧光增强?图像上是如何显示的呢?
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 楼主| 发表于 2013-12-14 21:45:29 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2013-12-14 15:53
如果发科研类文章,还是建议用foxP3更好一点,当然,也不是说CD127就不能发表。
在临床上的检测,还是CD1 ...

恩,是的,谢谢老师!
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发表于 2013-12-14 22:23:04 | 显示全部楼层
一丁点儿 发表于 2013-12-14 21:44
哦,谢谢老师!可是,老师,我还想请教下。。。。
有的时候对照管的阴性群就到了大概10的三次方的位置, ...

阴性就跑到这么高,那是得调。但如果是同一种标本上一次相同电压下是好的,这次跑这么高,就说明标本或者仪器出问题了。
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 楼主| 发表于 2013-12-14 22:49:59 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2013-12-14 22:23
阴性就跑到这么高,那是得调。但如果是同一种标本上一次相同电压下是好的,这次跑这么高,就说明标本或者 ...

哦,谢谢老师!那老师您一般是调阴性群在什么位置呢?之前做实验遇到一个同学,他说他们实验室的老师要求把阴性群保持在10的一次方以内。。。我同学说对他来说很困难。。。
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发表于 2013-12-14 23:46:14 | 显示全部楼层
破膜多久??
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 楼主| 发表于 2013-12-15 00:34:43 | 显示全部楼层

至少一个小时,有的时候一个小时多几分钟或者十分钟
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