流式电压

niwanmao

futiger 发表于 2014-6-5 23:02
晚上用细胞裂解液又做了一次同一样本，电压条件不同，您看那个好一点啊

你有没有在上机前观察过细胞形态，我觉得你这些细胞都成碎片了。

futiger

niwanmao 发表于 2014-6-6 19:39
你有没有在上机前观察过细胞形态，我觉得你这些细胞都成碎片了。

之前一直是把培养瓶里的细胞拿出来做的，但是图像不很好，考虑是不是像您说的有死细胞，后来就是用红细胞裂解液在分离同时，用全血做的，今天又做了一次，分离完的培养瓶里养着看的没问题

futiger

这是下午用红细胞裂解液做的PBMC

futiger

这个参数是FS 55 gain 5.0  ss 100 gain 20 我感觉应该让图像在X轴再往右移应该是提高FS的电压吧，但是我增高了感觉没什么变化第二张图增加到155了其他没变

niwanmao

futiger 发表于 2014-6-10 19:40
这个参数是FS 55 gain 5.0  ss 100 gain 20 我感觉应该让图像在X轴再往右移应该是提高FS的电压吧，但是我增 ...

这次就好很多了，淋巴细胞和粒细胞都跟碎片分得很开。

futiger

电压还需要再调高一些吗？感觉不是很开，另外，我标了一下，3是碎片，1是淋巴，2是粒细胞，倪老师您看对吗？

niwanmao

futiger 发表于 2014-6-10 20:46
电压还需要再调高一些吗？感觉不是很开，另外，我标了一下，3是碎片，1是淋巴，2是粒细胞，倪老师您看对吗 ...

不用再调高电压了，就这样吧。
你的分群标识是对的。

futiger

niwanmao 发表于 2014-6-10 21:54
不用再调高电压了，就这样吧。
你的分群标识是对的。

谢谢老师哈哈

futiger

niwanmao 发表于 2014-6-10 21:54
不用再调高电压了，就这样吧。
你的分群标识是对的。

倪老师，您指导完我又做了一次，然后标记了抗体，NKG2A加CD56双标，结果感觉单标的比较少，双标的多？这是为什么啊？另外您看我标记的红色的应该是淋巴细胞群吧，这个不是外周血的，是培养后的PBMC

futiger

还有，除了标记那一群外另外那一群我设门后看了下好像也有，是不是流式条件给的不太合适？