求助PBMC冻存和复苏

mcdfish

我用的是达优的 分的是牛的 觉得分离效果还行  操作简便， 就是红细胞有点多

need

钢蛋儿 发表于 2014-6-15 14:55
我天天提取PBMC，怎么可能不知道……………我的意思的，这个PDF没有说清楚，到底是冻存的全血还是冻存的PB ...

protocol 中用的是BD CPT采血管，直接离心后就能分离PBMC, 因此没有Ficoll分离的步骤。

BD Vacutainer® CPT™ Cell Preparation Tube with Sodium Citrate
http://www.bd.com/vacutainer/products/molecular/citrate/

钢蛋儿

need 发表于 2016-2-26 08:18
protocol 中用的是BD CPT采血管，直接离心后就能分离PBMC, 因此没有Ficoll分离的步骤。

BD Vacutainer® ...

高级啊，学习了@need @niwanmao

nailute1985

钢蛋儿 发表于 2016-3-8 20:50
高级啊，学习了@need @niwanmao

请问你们冻存PBMC的冻存液是如何配置的？

niwanmao

nailute1985 发表于 2016-4-27 15:21
请问你们冻存PBMC的冻存液是如何配置的？

一般应该都是20％ FBS＋10％DMSO＋70％ 1640

lin_ki

niwanmao 发表于 2014-6-15 17:17
嗯，确实，还是你看的仔细，我没注意到其中没写ficoll分离这一步
@钢蛋儿 兄能否提供一下你 ...

这个用的是CPT tube, 应该是直接取血后离心即可，不用再ficoll 分离了
https://www.bdbiosciences.com/us ... um-heparin/p/362753

lxk47640

niwanmao 发表于 2014-6-15 17:17
嗯，确实，还是你看的仔细，我没注意到其中没写ficoll分离这一步
@钢蛋儿 兄能否提供一下你 ...

它没提ficoll是因为直接用的BD CPT的PBMC分离管，倪老师不要被带跑偏了

lxk47640

钢蛋儿 发表于 2014-6-15 14:55
我天天提取PBMC，怎么可能不知道……………我的意思的，这个PDF没有说清楚，到底是冻存的全血还是冻存的PB ...

CPT管是含有分离液的分离管，直接采全血离心，就可以分离出PBMC，当然不用写，，居然说自己看的仔细。。。。

niwanmao

lxk47640 发表于 2016-9-20 13:15
CPT管是含有分离液的分离管，直接采全血离心，就可以分离出PBMC，当然不用写，，居然说自己看的仔细。。 ...

原来如此，学习了。

钢蛋儿

lxk47640 发表于 2016-9-20 13:15
CPT管是含有分离液的分离管，直接采全血离心，就可以分离出PBMC，当然不用写，，居然说自己看的仔细。。 ...

不可否认，“CPT管”有很多一线科研人员不能够理解
还是谢了