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楼主: INTORNS

[细胞因子检测] 求推荐补偿微球

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发表于 2016-3-25 08:35:53 | 显示全部楼层
家的感觉 发表于 2016-3-24 15:31
@小憨 非常感谢您的回复,很详细。麻烦再问一下,“3. 荧光通道的电压不改变”指的是这几次同一个通道电压 ...

电压改变会造成补偿值的改变,但是我不知道质控是指的是什么,我想如果改动了激光管或PMT的功率的话应该仪器的性能就会改变,电压和补偿都要调整。
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发表于 2016-3-25 08:52:05 | 显示全部楼层
小憨 发表于 2016-3-25 08:35
电压改变会造成补偿值的改变,但是我不知道质控是指的是什么,我想如果改动了激光管或PMT的功率的话应该 ...

恩,谢谢你的解答~~~
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发表于 2016-3-25 19:30:25 | 显示全部楼层
家的感觉 发表于 2016-3-25 08:24
恩,就是CST质控,如果今天重做了质控,会不会导致同一荧光的电压发生改变 ...

做了CS&T质控,返回Diva的时候它会提示你是否应用这次的CS&T条件,如果你接受了,那么就可能会改变电压等条件,如果不接受,就没事。不过,即使改变了,你也可以自己手工改回来嘛。
其实有时候不需要想这么多,很多时候,你做过几次,对补偿后的图形心里就有数了,即使出现问题,也能够微调回来。
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发表于 2016-3-28 08:52:27 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2016-3-25 19:30
做了CS&T质控,返回Diva的时候它会提示你是否应用这次的CS&T条件,如果你接受了,那么就可能会改变电压等 ...

好的,谢谢倪老师!
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发表于 2016-4-3 15:42:01 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2016-3-21 19:38
所有机器都一样,自动补偿那是作为一个参考,实际上最后还是需要根据样本进行微调,至少我做过十色,微球 ...

倪老师,您好,多色流式最后在上临床样本(应该是全染时)时如何去发现补偿的不足或过度呢?有什么具体的指标还是跟根据图进行调整,可以讲讲您的经验吗?谢谢!
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发表于 2016-4-3 20:18:54 | 显示全部楼层
gaga1989xl 发表于 2016-4-3 15:42
倪老师,您好,多色流式最后在上临床样本(应该是全染时)时如何去发现补偿的不足或过度呢?有什么具体的 ...

根据标本内残留的正常细胞的表达情况,基本上都可以找的到。
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发表于 2017-3-15 16:38:06 | 显示全部楼层
didi_zhou 发表于 2016-3-24 01:18
大多机器都有自动补偿程序,一般程序是先上Blank/ISOtype,这个主要是确定电压用。然后上单染管,这个时 ...

你好,最近用补偿微球做多色补偿时遇到一个问题:分别用微球和细胞样本去做单阳管,先用微球上机调荧光电压,阴阳分群都很好。但用细胞的单阳管上样后发现,用微球调好的荧光电压和细胞调节的荧光电压变化很大。那么该怎么确定荧光电压?既然电压不同,是不是意味着微球做的补偿就不能用于细胞样本了?谢谢!
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发表于 2017-3-15 16:38:27 | 显示全部楼层
小憨 发表于 2016-3-23 10:04
微球我见过两种,一种是阴性微球阳性微球各一瓶,用的时候混在一起,比如BD的;另一种是阴性、阳性直接混好 ...

你好,最近用补偿微球做多色补偿时遇到一个问题:分别用微球和细胞样本去做单阳管,先用微球上机调荧光电压,阴阳分群都很好。但用细胞的单阳管上样后发现,用微球调好的荧光电压和细胞调节的荧光电压变化很大。那么该怎么确定荧光电压?既然电压不同,是不是意味着微球做的补偿就不能用于细胞样本了?谢谢!
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发表于 2017-3-16 08:07:56 | 显示全部楼层
家的感觉 发表于 2017-3-15 16:38
你好,最近用补偿微球做多色补偿时遇到一个问题:分别用微球和细胞样本去做单阳管,先用微球上机调荧光电 ...

是的,微球的电压和补偿不能照搬用于细胞,因为两者物理特性完全不同,只能说微球的电压和补偿是一个参考,我大概知道应该是那个数字附近调节,不能代替。
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发表于 2017-3-17 08:11:18 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2017-3-16 08:07
是的,微球的电压和补偿不能照搬用于细胞,因为两者物理特性完全不同,只能说微球的电压和补偿是一个参考 ...

既然微球的补偿结果不能代替样本的补偿值,那只能是做个参考?如果样本由于量少或其他原因不能做补偿,只能大概参考微球补偿值来设置荧光补偿?和我想的补偿微球的作用有差别哈~~
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