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楼主: niwanmao

流式细胞术疑难解答(二):背景荧光(非特异性染色)高

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发表于 2015-6-5 09:11:35 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-6-4 21:37
这个其实你平时做免疫分型可以有很深的体会的,如果电压合适,只需要一点点补偿就能够调节到位,如果两个 ...

其实,文字我看明白了。主要是下面的图形没看明白。
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发表于 2015-6-5 09:11:59 | 显示全部楼层
就是这里,倪老师
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 楼主| 发表于 2015-6-5 13:20:00 | 显示全部楼层
zhang4083 发表于 2015-6-5 09:11
就是这里,倪老师

这是BV510和BV570的激发波长和发射波长,可以不用管。
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发表于 2015-6-5 14:22:33 | 显示全部楼层
看明白了。底下是发射波长在360和480,以及480和500之间的区别。多谢。
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发表于 2015-6-8 10:32:01 | 显示全部楼层
倪老师,您好!关于自发荧光那部分我问题。
1. 在区分自发荧光时,横坐标是GFP我可以理解,但纵坐标为什么是FL-2,而不是FL-3或者别的通道?
2. 为什么右边图中蓝色(AF)框圈的门里就是自发荧光,是什么原理?
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 楼主| 发表于 2015-6-8 10:48:54 | 显示全部楼层
EthanMr 发表于 2015-6-8 10:32
倪老师,您好!关于自发荧光那部分我问题。
1. 在区分自发荧光时,横坐标是GFP我可以理解,但纵坐标为什么 ...

1、常见的自发荧光都是发生在FITC和PE通道的,所以只会选择FL1和FL2。
2、AF圈内判断为自发荧光是因为FL2没有加任何标记却发出了光,所以判断为自发荧光。
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发表于 2015-6-8 11:27:06 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-6-8 10:48
1、常见的自发荧光都是发生在FITC和PE通道的,所以只会选择FL1和FL2。
2、AF圈内判断为自发荧光是因为FL2 ...

明白了,谢谢倪老师!
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发表于 2017-8-7 22:19:00 | 显示全部楼层
倪老师,您好!
对于第4条:这可能由多个因素引起,包括自发荧光增高和其它荧光素的渗漏增大引起?
原因是讲代谢活化,可到最后讲原因可却是自发荧光增高和其它荧光素的渗漏增大引起  。这两都有关系嘛? 没理解明白。请指教。谢谢!
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 楼主| 发表于 2017-8-8 13:00:57 | 显示全部楼层
zj8237277 发表于 2017-8-7 22:19
倪老师,您好!
对于第4条:这可能由多个因素引起,包括自发荧光增高和其它荧光素的渗漏增大引起?
原因是 ...

一些代谢产物(例如NAPDH等)会造成自发荧光增高,所以是引起自发荧光的因素之一,而FMO对照同时最主要反映的是荧光渗漏,所以这个图上FMO的荧光强度增高,可能存在这两种因素。
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发表于 2019-3-26 22:19:37 来自手机 | 显示全部楼层
好不错不错不错啊
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