流式细胞仪 激光laser 通道 filter Fluorescence 概念

liliqianyi

Arcrain 发表于 2015-7-14 17:16
这是非常基础的问题，慢慢就会明白的。
正好有时间，这里解释一下：

多谢了    好好领悟一下

qfzhang

Arcrain 发表于 2015-7-14 17:16
这是非常基础的问题，慢慢就会明白的。
正好有时间，这里解释一下：

精彩至极，尤其是 针孔镜的部分，解答了我长久以来的疑惑。不同激光激发的荧光素，为什么不需要或者需要很低的补偿。
看了这个就明白了，因为是从物理空间上进行了隔离。

chevalierx

niwanmao 发表于 2015-7-6 22:02
每种激光波长可以激发多种荧光素，这些荧光素会发出不同的波长，所以需要用不同的滤镜来检测。

例如488nm ...

倪老师好，最近在配多色，有几个问题想请教下。
（1）例：在calibur中，FITC和PE的激发光都是488，所以会产生漏光，对于同属于488的2个通道间的漏光需要调整补偿，但在fortessa中FITC是488+530/30，PE是561+586/15，这样是不是就不需要调整补偿了，因为不产生重叠？
（2）是不是只要激发光不同，发射光重叠也不需要调整补偿？例：PE-Cy7是561+780/60，APC-eFluor 780是640+780/60，这样是否也不需要调整补偿？
谢谢指点！

niwanmao

chevalierx 发表于 2017-12-18 01:48
倪老师好，最近在配多色，有几个问题想请教下。
（1）例：在calibur中，FITC和PE的激发光都是488，所以会 ...

理论上是，但实际上，例如我们在分析PC7和APC的数据时，有时候发现也需要微调一点点才使图形更好看。

白晶晶2019

Arcrain 发表于 2015-7-14 17:16
这是非常基础的问题，慢慢就会明白的。
正好有时间，这里解释一下：

所以红激光激发APC-cy7和蓝激光激发PE-cy7出的光谱不会重叠？都是785

chunfeng

niwanmao 发表于 2015-7-6 22:02
每种激光波长可以激发多种荧光素，这些荧光素会发出不同的波长，所以需要用不同的滤镜来检测。

例如488nm ...

站长你好。对于上面的回答有几个不同意见。不知是否准确。505LP应该是反射小于505nm， 530/30应该是515-545nm可以通过。

niwanmao

chunfeng 发表于 2020-7-22 19:51
站长你好。对于上面的回答有几个不同意见。不知是否准确。505LP应该是反射小于505nm， 530/30应该是515-5 ...

是的。

chunfeng

niwanmao 发表于 2020-7-22 23:01
是的。

终于又可以打开网站啦~感谢站长

pilihua

chymanhz 发表于 2015-7-8 10:54
你拿到抗体时，你会看到说明书里提到激发光多少波长范围，发射光多少范围。这里提到的激发光波长就是激光器 ...

你好，我想问一下，FITC的滤光片为何有的是530/30  有的是525/40 ？可以获得不同的荧光量，那为何不把带宽放的很大，直接获取100% 呢？

pilihua

chymanhz 发表于 2015-7-8 10:54
你拿到抗体时，你会看到说明书里提到激发光多少波长范围，发射光多少范围。这里提到的激发光波长就是激光器 ...

我们注意到，虽然FITC的主峰是519，但是不管530还是525的滤光片，都是没有把中心波长放在519，这是为什么？