为什么会存在荧光补偿？如何调节？看图！

niwanmao

zyxuhao 发表于 2017-5-9 17:52
@niwanmao 老师 请问 多色的时候岂不是要一种颜色下的阴性阳性群体在其他颜色的MFI都接近 这样实际操作起来 ...

多色调节补偿，可以采购几个荧光素覆盖各通道的CD3抗体。

谱一首幸福

倪老师，看这幅图好像是双染调节的补偿，可为什么我们一般调补偿用的都是单染的positive？

niwanmao

谱一首幸福 发表于 2017-11-4 08:50
倪老师，看这幅图好像是双染调节的补偿，可为什么我们一般调补偿用的都是单染的positive？ ...

单染管是比较标准的推荐，并且容易让软件来帮你自动计算补偿。
但如果补偿做得熟练的话，并且你的细胞群有两个单阳性细胞群体，那么就可以同时标记两个抗体，直接调。

bryant2483341

niwanmao 发表于 2017-11-4 09:36
单染管是比较标准的推荐，并且容易让软件来帮你自动计算补偿。
但如果补偿做得熟练的话，并且你的细胞群 ...

倪老师，请问软件实现自动补偿有什么算法吗？

niwanmao

bryant2483341 发表于 2018-1-4 17:13
倪老师，请问软件实现自动补偿有什么算法吗？

具体的算法我不太清楚，应该是自己寻找阳性群和阴性群，然后通过计算，将两者中位数调到一致吧

bryant2483341

niwanmao 发表于 2018-1-4 18:10
具体的算法我不太清楚，应该是自己寻找阳性群和阴性群，然后通过计算，将两者中位数调到一致吧 ...

好的，谢谢

archerliang

倪老师，你贴的那三张图使用单染管做的吗？那为什么会同时有fitc和pe的阳性？

niwanmao

archerliang 发表于 2019-4-8 14:12
倪老师，你贴的那三张图使用单染管做的吗？那为什么会同时有fitc和pe的阳性？ ...

这是因为细胞群里面，同时有两者单阳性的细胞。例如我做淋巴细胞的CD4和CD8染色，由于同时存在这两种抗体单阳性的细胞，所以也会出现这种分布。

白晶晶2019

niwanmao 发表于 2017-5-9 22:16
多色调节补偿，可以采购几个荧光素覆盖各通道的CD3抗体。

倪老师，多色流式是每种荧光素都买CD3的抗体吗？用单参数直方图调节补偿？

niwanmao

白晶晶2019 发表于 2019-11-18 10:47
倪老师，多色流式是每种荧光素都买CD3的抗体吗？用单参数直方图调节补偿？ ...

是的，只是染的细胞需要是T细胞才行。