IL17流式检测

mamba

niwanmao 发表于 2017-1-21 12:17
同型对照的选择十分难选，要求亚型、浓度、荧光素都完全一致，并不是说同一家公司就肯定就可以。所以目前 ...

我的意思就是用APC-IL17和PE-FOXP3标记的我养的细胞，我传的流式图IL17分群不明显啊，倪老师，你看见没有，我用上面的圈门方法对吗？

niwanmao

mamba 发表于 2017-1-21 23:24
我的意思就是用APC-IL17和PE-FOXP3标记的我养的细胞，我传的流式图IL17分群不明显啊，倪老师，你看见没有 ...

还需要看看fsc/ssc，因为你的同型对照怎么会有这么明显一堆apc阳性信号，不太正常。

mamba

niwanmao 发表于 2017-1-22 17:16
还需要看看fsc/ssc，因为你的同型对照怎么会有这么明显一堆apc阳性信号，不太正常。 ...

图一是我的ssc和fsc，图二为空白管划门，圈出来的结果就是图三，有问题吗？

niwanmao

mamba 发表于 2017-1-22 20:30
图一是我的ssc和fsc，图二为空白管划门，圈出来的结果就是图三，有问题吗？
...

第一个FSC/SSC的图是空白管还是实验管的？

mamba

niwanmao 发表于 2017-1-22 20:33
第一个FSC/SSC的图是空白管还是实验管的？

实验管啊，倪老师，要擦擦眼睛啦，图上面有标注的，图一与图三是一起的，为同一管，我只是以图二来圈门的

niwanmao

mamba 发表于 2017-1-22 20:38
实验管啊，倪老师，要擦擦眼睛啦，图上面有标注的，图一与图三是一起的，为同一管，我只是以图二来圈门 ...

同型对照、空白管的FSC/SSC呢？要全部放出来对比看看。
从这里看，实验管的设门位置肯定不对。

mamba

niwanmao 发表于 2017-1-22 20:33
第一个FSC/SSC的图是空白管还是实验管的？

此图为我标记的方法，1为空白，2为IL17的同型，三为IL-17的单标，4为foxp3的单标，5为IL17的同型和foxp3，6为IL17和foxp3.。。。。。。

mamba

niwanmao 发表于 2017-1-22 20:45
同型对照、空白管的FSC/SSC呢？要全部放出来对比看看。
从这里看，实验管的设门位置肯定不对。 ...

问题出在哪里呢？圈门该如何圈呢？IL-17到底有没有呢？

niwanmao

mamba 发表于 2017-1-22 21:07
问题出在哪里呢？圈门该如何圈呢？IL-17到底有没有呢？

问题还是在同型对照的非特异性结合上，因此还是需要Fc Blocking。你的问题详细原因和阻断方法请参见：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5510-1-1.html
你之前提到的那几种都没有阻断效果。

mamba

niwanmao 发表于 2017-1-22 21:53
问题还是在同型对照的非特异性结合上，因此还是需要Fc Blocking。你的问题详细原因和阻断方法请参见：htt ...

我一直在纠结买与不买，有时候就想用阴性对照来圈门。你说IL17诱导后分群明显，我这分群不明显，从我的结果来看，难道没诱导出？