我的Treg在哪里

774055480

niwanmao 发表于 2017-3-30 10:11
跟CD25抗体的克隆号可能会有关系。

谢谢倪老师提醒，我会去做一下验证

cocoyan

niwanmao 发表于 2017-3-30 10:11
BD什么破膜剂？有些破膜剂无法破核膜的，需要注意！！！！

BD的transcription Factor Buffer  Set  货号562574，不知道这种能不能行啊，老师。
还有一个疑问：
老师有没有可能是补偿实验的时候调的PE电压太低了，我不记得我当时是不是每一管都加了PE的FOXP3抗体了，因为那天做实验分细胞拖了3-4个小时，实验室老师把我训了一顿，我脑袋晕晕的。

cocoyan

老师我用的BD货号562574的Transcription Factor Buffer  Set，这个破膜剂可以吗。
另外老师我把我的原始数据发给您，您帮忙看看行吗。

niwanmao

cocoyan 发表于 2017-3-30 20:23
BD的transcription Factor Buffer  Set  货号562574，不知道这种能不能行啊，老师。
还有一个疑问：
老师 ...

这个Buffer看名称应该是对的，但是如果你抗体没加，那就白搭。

congou

染FOX3时，细胞先要用药物把FOX3蛋白阻断再高尔基体， 这样细胞内的FOX3的量才能达到检测灵敏度。

小憨

congou 发表于 2017-3-31 23:11
染FOX3时，细胞先要用药物把FOX3蛋白阻断再高尔基体， 这样细胞内的FOX3的量才能达到检测灵敏度。 ...

Foxp3在细胞核里……

niwanmao

congou 发表于 2017-3-31 23:11
染FOX3时，细胞先要用药物把FOX3蛋白阻断再高尔基体， 这样细胞内的FOX3的量才能达到检测灵敏度。 ...

你说的应该是那些胞内细胞因子。foxP3在细胞核内，可直接测

cocoyan

niwanmao 发表于 2017-3-31 21:12
这个Buffer看名称应该是对的，但是如果你抗体没加，那就白搭。

老师，我抗体加了，但是出来的图就是这个样子的

cocoyan

niwanmao 发表于 2017-3-31 21:12
这个Buffer看名称应该是对的，但是如果你抗体没加，那就白搭。

我的意思是，我可能在同型对照里也加了FOXP3抗体，
所有的管子里都加了抗体。
这样的话是不是调补偿的时候就设置的参数有问题啊

niwanmao

cocoyan 发表于 2017-4-5 10:10
我的意思是，我可能在同型对照里也加了FOXP3抗体，
所有的管子里都加了抗体。
这样的话是不是调补偿的时 ...

如果确定都加了，我还是那个意见：
1、换一下破膜剂，用其它公司的，或者试一下我们流式中文网的这个MemMagician试用装。
2、从别人那里借一点其它克隆号的foxP3抗体，验证是否抗体问题。