请教分析人NK细胞的抗体和荧光的选择

cellprobe

大家好，我想分析人的NK细胞，
想用以后marker:
CD45
CD3
CD16
CD56
NKG2D
NKG2A
NKp30, NKp44, NKp46
IFN-r
TNF-a

但是我不知道怎么选择荧光啊？  请大家指教，谢谢。


还有，这些NK细胞是从人的PBMC中诱导得来的，应该也表达IFN-r和TNF-a吗？

谢谢

niwanmao

你们的机器是什么配置？包括激光器和滤光片

cellprobe

niwanmao 发表于 2017-5-15 19:06
你们的机器是什么配置？包括激光器和滤光片

机器是Beckman的，有几台机器呢，具体什么型号也不清楚

niwanmao

cellprobe 发表于 2017-5-16 09:56
机器是Beckman的，有几台机器呢，具体什么型号也不清楚

必须知道详细配置才能搭配，否则荧光搭出来用不起来，不就白买了吗

cellprobe

niwanmao 发表于 2017-5-16 12:26
必须知道详细配置才能搭配，否则荧光搭出来用不起来，不就白买了吗

好的 谢谢 谢谢

ghqiu09

这个是临床样品吗？如果不是的话，感觉CD45不一定必要吧，如果是4色机器，那这个得分好几组才能测得全啊，不过还要看你的实验目的了

ghqiu09

niwanmao 发表于 2017-5-15 19:06
你们的机器是什么配置？包括激光器和滤光片

倪老师，其实我一直不是很明白，在有些流式中为什么需要加CD45呢？T，B淋巴细胞直接标记CD3，CD19不能代表就是T，B吗？当然，加上也没有错，不过并不是必要的吧？希望老师可以解答下，谢谢

cellprobe

niwanmao 发表于 2017-5-16 12:26
必须知道详细配置才能搭配，否则荧光搭出来用不起来，不就白买了吗

去哪里看荧光搭配和选择？就是怎么分析的

niwanmao

ghqiu09 发表于 2017-5-19 08:49
倪老师，其实我一直不是很明白，在有些流式中为什么需要加CD45呢？T，B淋巴细胞直接标记CD3，CD19不能代 ...

CD45是所有白细胞的标记，结合FSC和SSC，可以很好的区分淋、单、粒，这样子，再加上CD3、CD19，可以使细胞群更纯粹，因为流式有时候会出现一些非特异性染色。

ghqiu09

cellprobe 发表于 2017-5-19 10:30
去哪里看荧光搭配和选择？就是怎么分析的

主要是知道你们那的流式是什么配置，比如有几根激光管，可以测几种颜色，同一型号的流式细胞仪也会有不同的配置的。