请教分析人NK细胞的抗体和荧光的选择

cellprobe

ghqiu09 发表于 2017-5-19 16:10
主要是知道你们那的流式是什么配置，比如有几根激光管，可以测几种颜色，同一型号的流式细胞仪也会有不同 ...

我们用的是贝克曼库尔特Gallios流式细胞仪，三激光十通道的，488nm  638nm   405nm。

cellprobe

niwanmao 发表于 2017-5-19 11:28
CD45是所有白细胞的标记，结合FSC和SSC，可以很好的区分淋、单、粒，这样子，再加上CD3、CD19，可以使细 ...

人的DC细胞应该不表达CD45吧？

niwanmao

cellprobe 发表于 2017-5-25 17:32
人的DC细胞应该不表达CD45吧？

DC高表达CD45。你们用Gallios的话，可以做10色。
以下配色供参考：

CD45 KO
CD3 PB
CD16 FITC
CD56 APC-A750
NKG2D PC5.5
NKG2A PC7
NKp30, NKp44, NKp46 APC-A700
IFN-r PE
TNF-a APC

cellprobe

niwanmao 发表于 2017-5-25 18:44
DC高表达CD45。你们用Gallios的话，可以做10色。
以下配色供参考：

我刚才问的有点叉了。
CD45 KO
CD3 PB
CD16 FITC
CD56 APC-A750
NKG2D PC5.5
NKG2A PC7
NKp30, NKp44, NKp46 APC-A700
IFN-r PE
TNF-a APC


以上是NK细胞的染色方案吧？

我又突然想问DC细胞表达CD45吗？

niwanmao

cellprobe 发表于 2017-5-26 09:44
我刚才问的有点叉了。
CD45 KO
CD3 PB

我上面回答了，DC高表达CD45.

cellprobe

niwanmao 发表于 2017-5-26 18:10
我上面回答了，DC高表达CD45.

倪老师，我开始准备用CD45，CD80，CD83，CD86，HLA-DR, CD14(monocyte)分析由外周血得来的DC细胞。但是另外一个老师说分析CD83和CD86就够了，可以不分析CD80。他还建议我加上2个关于DC功能的标志物：CD123和CD11c。 请问您看怎样？ CD45+CD83+CD86+HLA-DR+CD123+CD11c+CD14-

在设门的时候，先设置FSC/SSC，再设置CD45/SSC，然后分析每种标志物的表达水平（histogram）是吗？

niwanmao

cellprobe 发表于 2017-5-31 15:00
倪老师，我开始准备用CD45，CD80，CD83，CD86，HLA-DR, CD14(monocyte)分析由外周血得来的DC细胞。但是另 ...

CD123和CD11c是用来区分mDC和pDC的

cellprobe

niwanmao 发表于 2017-5-31 21:48
CD123和CD11c是用来区分mDC和pDC的

倪老师，那么用CD45+CD123+CD11C+CD83+CD86+HLA-DR+CD14- 分析由外周血得来的DC细胞，行吗？请再次指教

喃呢

niwanmao 发表于 2017-5-19 11:28
CD45是所有白细胞的标记，结合FSC和SSC，可以很好的区分淋、单、粒，这样子，再加上CD3、CD19，可以使细 ...

请问，如果我测NK的CD3-CD16+CD56+，如果用CD3-FITC，CD16-APC，CD56-APC能做出来吗？

niwanmao

喃呢 发表于 2017-12-25 10:45
请问，如果我测NK的CD3-CD16+CD56+，如果用CD3-FITC，CD16-APC，CD56-APC能做出来吗？ ...

CD16、CD56用同一荧光素，可以测出总NK，但NK里面的亚群NK1、NK2、NK3就无法区分了。