求助小鼠外周血FSC-SSC白细胞分群

youzi821

niwanmao 发表于 2018-1-27 23:01
左侧那小堆不一定是淋巴细胞，可能是较大的碎片

红细胞裂解不充分会是什么样的分布图呢？

chevalierx

我的感觉，你的ssc-A电压打高了，单核细胞出去了，你可以尝试下把淋巴细胞压下来成扁状，我做出来，双lin图，左下至右上，lymphocyte, neutrophil, macrophage/monocyte/dendritic cell

niwanmao

youzi821 发表于 2018-2-11 12:40
红细胞裂解不充分会是什么样的分布图呢？

裂解不充分就是导致淋巴细胞左侧的碎片区域大量信号，并且与淋巴细胞分不开。

aha

niwanmao 发表于 2017-9-27 12:22
可能对，但是也可能单核位置不对，因为单纯根据物理学参数，单核有时候分得不会很好，建议要么加一个CD45， ...

老师，你好，我想咨询一下，我的样品是肺灌洗液，但是现在要区分中性粒细胞，嗜酸性粒细胞以及淋巴细胞和巨噬细胞，你知道用那些特异性标记吗？或者不用标记也可以通过流式区分吗
，谢谢老师

niwanmao

aha 发表于 2019-7-24 11:27
老师，你好，我想咨询一下，我的样品是肺灌洗液，但是现在要区分中性粒细胞，嗜酸性粒细胞以及淋巴细胞和 ...

不用标记只能分出中性粒和淋巴、巨噬，但由于灌洗液收集的细胞，往往FSC和SSC会有所变化，导致分群不清，所以推荐用特异性标记。

B Cells        CD19
T Cells        CD3, CD49b (clone DX5) (-)
Natural Killer Cells        CD3(-), CD49b (clone DX5)
Macrophage*         F4/80, CD68
Monocyte*         CD11bhi, CD115hi, Gr-1lo, Ly-6C
Neutrophils        CD11b, CD115(-), Ly-6B.2, Ly-6Clo/neg, Ly6G, Gr-1
Basophils        CD200R3, FcεRIα
Eosinophils        CD11b, CD193, F4/80, Siglec-F
资料来源：https://www.biolegend.com/en-us/essential-markers

aha

niwanmao 发表于 2019-7-26 07:58
不用标记只能分出中性粒和淋巴、巨噬，但由于灌洗液收集的细胞，往往FSC和SSC会有所变化，导致分群不清， ...

相当全面了，谢谢老师。