为什么镜下观察细胞增殖很明显，cfse只有部分出来了增殖...

一僧化画 · 发表于 2018-1-8 08:52:15

niwanmao 发表于 2018-1-5 20:59
CFSE的染色肯定是没有选择性的，也会染MSC，但是只要终浓度一致，应该不至于出现这么大差异。
我在想，你 ...

好的，真心感谢老师的回复，cfse用2uM染后离心后细胞都会变为黄绿色，下次尝试一下用1uM染色试试看！

tiger · 发表于 2018-1-8 16:06:12

一僧化画发表于 2018-1-8 08:50
确实是个好建议！下次上机的时候也染一下CD3 marker,在培养时间上也调整一下试试！ ...

一定要加CD3 MAKER，分析CFSE与CD3双阳性细胞。要用Modfit软件分析。

一僧化画 · 发表于 2018-1-10 16:04:26

tiger 发表于 2018-1-8 16:06
一定要加CD3 MAKER，分析CFSE与CD3双阳性细胞。要用Modfit软件分析。

嗯嗯，好的，最近准备加下cd3 maker 再做下看

一僧化画 · 发表于 2018-1-10 16:06:05

niwanmao 发表于 2018-1-5 20:59
CFSE的染色肯定是没有选择性的，也会染MSC，但是只要终浓度一致，应该不至于出现这么大差异。
我在想，你 ...

想请教一下老师，我下次上流式时想染个活性染料，排除一下死细胞的影响，老师有什么推荐的试剂适合我这个实验吗

niwanmao · 发表于 2018-1-10 16:15:00

一僧化画发表于 2018-1-10 16:06
想请教一下老师，我下次上流式时想染个活性染料，排除一下死细胞的影响，老师有什么推荐的试剂适合我这个 ...

最便宜的是PI，贵的有商品化死活鉴别染料live/dead或zombie

tiger · 发表于 2018-1-15 15:28:33

一僧化画发表于 2018-1-10 16:04
嗯嗯，好的，最近准备加下cd3 maker 再做下看

从镜下观察来看，细胞增殖很明显，请把原始数据传上来，帮你分析下。

一僧化画 · 发表于 2018-1-17 08:52:30

本帖最后由一僧化画于 2018-1-17 08:56 编辑

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一僧化画 · 发表于 2018-1-17 08:57:31

tiger 发表于 2018-1-15 15:28
从镜下观察来看，细胞增殖很明显，请把原始数据传上来，帮你分析下。

已上传，谢谢你！

tiger · 发表于 2018-1-17 12:03:50

一僧化画发表于 2018-1-17 08:57
已上传，谢谢你！

在以后的实验中请保留一份染了CFSE的脾脏细胞做为CFSE的阳性对照，也就是父代淋巴细胞。在测试时将这份细胞的CFSE信号调到最大，FSC和SSC信号调到最小。因为细胞增殖后体积会明显增大。且要加CD3和CD4标记。将这几群不同表型的细胞分别分析，会有意外收获。

一僧化画 · 发表于 2018-1-18 15:46:40

tiger 发表于 2018-1-17 12:03
在以后的实验中请保留一份染了CFSE的脾脏细胞做为CFSE的阳性对照，也就是父代淋巴细胞。在测试时将这份细 ...

谢谢您的耐心解答和专业的回复！下次一定采纳你的意见试下！

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[结构和原理] 为什么镜下观察细胞增殖很明显，cfse只有部分出来了增殖...