bi-exponential双指数问题

immunology

一直不太懂双向指数（bi-exponential）是如何算出来的，查找文献说的是“双向指数（也叫Logicle数据形式）是将检测到的荧光信号值减去非特异性荧光信号值，然后以对数表示”，那么流式机器是怎么确定哪部分是非特异荧光值的，非特异荧光指的是哪部分？

1.然后又说选择双指数坐标轴以后，如果补偿调节得当，阴性细胞群应该在0值两侧呈对称分布，那我图1这个图CD4--FITC和IL-17A--PE阴性群（红色圈内） 并没有关于 双指数图的0点 对称分布（此图是样品管的图，不是单阳管的图），是不是意味着补偿没有调好？
同样，FITC和APC在双指数图中，阴性群也没有关于0点对称（貌似APC的坐标关于0点对称）？  
但是我当时单阳管调补偿时，通过圈阳性细胞群和阴性细胞群，用中位数法，确实已经中位数相等了啊？
如果是补偿没有调好，是谁向谁的补偿没有调好呢？


2.如果说，我在双阴管中为了确定各个荧光通道合适的电压，用各个荧光坐标作为横坐标的直方图(Histogram)中，把横坐标调成  双指数形式，是不是要调电压使直方图关于0点对称成正态分布呢？这种做法对吗？   

用阴性管调各荧光电压，确定阴性群位置的时候，是普通指数直方图好，还是用双指数直方图好？

niwanmao

双指数不是减去非特异性荧光，你理解错了。双指数是叫Logicle，是一种算法，使得Log转换后负值也能够显示出来。

你图中的补偿，是FITC－APC/R700减得太多了，实际上这两个通道应该是没有补偿，不需要调的。

直方图中，对呈什么对称没有要求，勿纠结。