内皮祖细胞标记

niwanmao

lpxfl 发表于 2013-5-7 22:59

                               
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老师，您好，我也在研究内皮祖细胞，我想请教下您，我想鉴定CD34 CD133 VEGF CD144，我该怎么设门呢，谢谢 ...

你可以按照你要鉴定的表型，按照上述帖子中指示的样子进行逐级设门。

lpxfl

老师您好，我昨天在鉴定内皮祖细胞表面抗原的时候，不小心把FSC和SSC都选成Lin模式了，最后实验没结果，我想问一下老师，选择成这个模式和选择成FSC-Lin，SSC-Log，模式，有什么本质的区别吗？谢谢

niwanmao

lpxfl 发表于 2013-6-26 23:07

                               
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老师您好，我昨天在鉴定内皮祖细胞表面抗原的时候，不小心把FSC和SSC都选成Lin模式了，最后实验没结果，我 ...

没有关系的，都可以用的。

dragonhzqsmmu

这个比例是不是很低很低，之前听别人说做小鼠的EPCs大概要收集10万个细胞

niwanmao

dragonhzqsmmu 发表于 2013-7-1 09:42

                               
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这个比例是不是很低很低，之前听别人说做小鼠的EPCs大概要收集10万个细胞

10万个算少的。100万都很正常吧。

dragonhzqsmmu

niwanmao 发表于 2010-11-19 08:33

                               
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首先，用CD45-SSC或FSC-SSC设门，圈淋巴细胞区域R1。
其次，画CD34/CD133和CD133/VEGF的双坐标点图，逐级设 ...

个人感觉EPCs的流式细胞检测流程没有通用统一，各家有各家的说法和做法，不知道老师能否给出一个比较通用的分析人和小鼠的EPCs的protocol？多谢

老师看看这个附件里面的人的EPCs的protocol如何？

niwanmao

dragonhzqsmmu 发表于 2013-7-8 19:08

                               
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个人感觉EPCs的流式细胞检测流程没有通用统一，各家有各家的说法和做法，不知道老师能否给出一个比较通用 ...

Plos One杂志最近这些年比较乱，虽然影响因子还算高，但还是尽量别参考。
而且，这篇文章中只用了CD45、CD34和KDR，还是不太可靠，对EPC不是很有特异性。

一般除了上述标记，最好加上CD31和CD133。

建议参考这两篇文章：
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20381496
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21423014

dragonhzqsmmu

niwanmao 发表于 2013-7-8 22:03

                               
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Plos One杂志最近这些年比较乱，虽然影响因子还算高，但还是尽量别参考。
而且，这篇文章中只用了CD45、C ...

老师，是否Journal of Immunological Methods杂志比较靠谱点？

yamamomo

niwanmao 发表于 2011-11-7 22:10
如果能够确定内皮干祖细胞位于淋巴细胞位置，这样也是可以的。但是建议还是按照我这样，可以防止遗漏一些 ...

老师，您的意思是不确定内皮祖细胞位于淋巴细胞位置，所以设R1的时候，需要把淋巴细胞跟单核细胞都圈进去么？因为密度梯度离心后，细胞分了3团，最下边横坐标200-400的细胞团，400-600的细胞团，和右上角的一大团细胞。这是分离效果不太好的结果吧。

niwanmao

yamamomo 发表于 2014-12-8 12:55
老师，您的意思是不确定内皮祖细胞位于淋巴细胞位置，所以设R1的时候，需要把淋巴细胞跟单核细胞都圈进去 ...

是的，需要圈大一点。
至于你所说的细胞分成三团，没看到图不知道你指的是什么。