RO 即受体占位的相关检测讨论

飞翔

毛豆24821 发表于 2019-10-30 10:27
请教，各位，每一个sample的背景MFI（blank）是否是必须的？
Receptor Occupancy(%)=MFI（sample）-MFI（bl ...

对其中的MFI（饱和值）不太理解，不同抗体相同浓度对同一细胞的MFI（饱和值）不同，抗体1和抗体2，因为抗体亲和力原因，抗体1存在饱和值，抗体2不存在饱和值，在做Receptor Occupancy(%)时，这个MFI（饱和值）怎么确定？按各自抗体的？不知道你有什么看法

毛豆24821

飞翔 发表于 2020-3-31 09:31
对其中的MFI（饱和值）不太理解，不同抗体相同浓度对同一细胞的MFI（饱和值）不同，抗体1和抗体2，因为抗 ...

这种情况我们也遇到过。基于这样的前提，RO的检测也是无意义的。这种无法确定饱和值的抗体我们建议是做半定量检测。RO是测试占有率，需要知道“分母”，即整体饱和水平，这个如果无法获得，可以仅仅比较“分子”，即各组动物的占有水平，来间接评价不同剂量组是否存在差异，以及各组的动物间是否存在个体差异和差异水平。

请教你们实验室对于RO的稳定性及CV是如何去操作的。

飞翔

毛豆24821 发表于 2020-4-1 09:51
这种情况我们也遇到过。基于这样的前提，RO的检测也是无意义的。这种无法确定饱和值的抗体我们建议是做半 ...

你好，第一次做这个实验只做了前期实验，遇到过这个情况。后期因为实验时间问题委托给CRO公司了，看到委托合同，没看到最后的结果，不知道是怎么检测计算的。RO的CV上同一浓度检测三次CV＜25% 。好多需要学习

yzhang

ro一直不能达到平台怎么办？

niwanmao

yzhang 发表于 2020-9-17 18:32
ro一直不能达到平台怎么办？

找到拐点位置，在拐点浓度前、后，设置几个梯度点，再试。

飞翔

yzhang 发表于 2020-9-17 18:32
ro一直不能达到平台怎么办？

是靶点和抗体的原因，亲和力太低，导致一直达不到上平台的

赤道与北极

HI，楼主，不知道你是都做过双特异性抗体两个靶点在一个细胞上的RO，如何进行分靶点的RO检测，谢谢

毛豆24821

赤道与北极 发表于 2022-10-24 08:52
HI，楼主，不知道你是都做过双特异性抗体两个靶点在一个细胞上的RO，如何进行分靶点的RO检测，谢谢 ...

用母本单抗分别做。

赤道与北极

HI,楼主好，不知道楼主有没有做过双靶点同细胞双抗药物的RO分析，可以交流交流，遇到了些问题。

赤道与北极

毛豆24821 发表于 2022-10-25 10:36
用母本单抗分别做。

不行，药物已经存在于样本中，需要测分靶RO.