关于平均荧光强度的问题

ruyudeshui · 发表于 2011-7-7 18:42:11

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您好，我想请教一下怎样测血清中的抗体浓度？还有平均荧光强度有单位吗，是什么？

ruyudeshui · 发表于 2011-7-7 18:45:18

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倪老师，您好，我想问一下平均荧光强度有单位吗，是什么？还有就是如果我用FITC单染测细胞表面蛋白，用什么指标来衡量，是阳性百分比还是平均荧光强度？

niwanmao · 发表于 2011-7-7 20:09:48

ruyudeshui 发表于 2011-7-7 18:45

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倪老师，您好，我想问一下平均荧光强度有单位吗，是什么？还有就是如果我用FITC单染 ...

1、荧光强度是没有单位的。
2、用百分比还是荧光强度来表示结果，需要看你的研究目的和研究指标的表达差异度，如果两个标本均高表达或弱表达，仅在强度上有差异，这时百分比就体现不出它们之间的差异，可采用平均荧光强度来表达它们之间的差异；如果一个标本高表达，一个标本弱表达，那么这时可以采用百分比（当然，平均荧光强度也是可以）

samly0 · 发表于 2011-7-8 11:40:58

太有用了

chujindong · 发表于 2011-8-17 18:09:02

本帖最后由 chujindong 于 2011-8-17 18:10 编辑

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不知道这个怎么做的。这个荧光强度是上机后用FCS文件分析的还是必须上机时才能分析的？

niwanmao · 发表于 2011-8-17 19:32:37

chujindong 发表于 2011-8-17 18:09

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不知道这个怎么做的。这个荧光强度是上机后用FCS文件分析的还是必须上机时才能分析 ...

你是说mean和geomean？这两个参数在cellqeust分析和获取的时候都可以显示，不知道facs diva怎么样，我没用过。

haven_t · 发表于 2011-8-17 21:03:13

本帖最后由 haven_t 于 2011-8-17 21:07 编辑

有流式情结吗？为什么做液相的东西还要用流式，一定要用的话就CBA吧，不过很贵，要不退而求次用液相芯片，也是流式的技术，这两种技术的特点是同时检测多个蛋白，高通量。不过如果是我的话绝对会选ELISA。

另外荧光也是光，强度是有单位的，叫“流明”不过流式检测的荧光强度是没有单位的，因为光电倍增管电压的高低直接影响检测值，有人会把数值跟空白的比较这时候叫“相对荧光强度”。

haven_t · 发表于 2011-8-17 21:18:22

在使用数字型流式细胞仪的时候GEO往往是不能获得的，在模拟型的时候荧光强度最低是1（对数后），而数字型是通过在电脑上补偿矩阵运算，所以经常会出现负值，倪兄上面说的是书本对GEO其中一个描述，在电脑上是无法实现的，因为计算机上没有空间进行上万个细胞进行乘法运算，一般算法是对每个荧光强度进行对数运算，再求算术均值，但负值是无法进行对数运算的，所以只要有一个细胞是负值就无法得到GEO的值了。

liuxin · 发表于 2012-1-3 09:16:15

本帖最后由 liuxin 于 2012-1-3 16:30 编辑

请问用不同体积的未知抗体的时候发现细胞团是稍微移动的，那在分析的时候是应该分别移动门分析？还是公用一个门？

liuxin · 发表于 2012-1-3 09:17:22

补充：就是测抗体浓度的时候

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