NK细胞检测CD16

niwanmao

yiyishilihui 发表于 2021-2-26 22:38
[/img]

AF488通道是CD3？？？
AF488的spreading error太大了，新鲜未刺激是如何的？

yiyishilihui

老师，上面是同一个样用PMA/ION刺激的，下面是没刺激的，刺激后CD16将为个位数。

yiyishilihui

yiyishilihui 发表于 2021-2-27 11:39
老师，上面是同一个样用PMA/ION刺激的，下面是没刺激的，刺激后CD16将为个位数。
...

FITC-CD3,CD14,CD19
BB700-CD56
BV605-CD16

niwanmao

yiyishilihui 发表于 2021-2-27 11:40
FITC-CD3,CD14,CD19
BB700-CD56
BV605-CD16

你的检测方案里面确定只有这三个抗体？是不是加了其它抗体，只显示出这三个？

混合抗体产生这么大的扩散误差，实在是不好，即使你的CD16出来了，发文章也要被质疑检测质量了。

yiyishilihui

niwanmao 发表于 2021-2-28 14:03
你的检测方案里面确定只有这三个抗体？是不是加了其它抗体，只显示出这三个？

混合抗体产生这么大的扩散 ...

老师，还有其他抗体，这个panel的颜色分别是FITC
BB700
BV605
PE-Cy5
PE-Cy7
PE-CF594
PE
APC
BV650
BV711
BV421
FVS780

一共12色，准备Fortessa做的，我们机器的通道是下面的

	Channel	Optical  Filter		Fluorescence
355	A	635LP	670/50BP	BUV661
	B	450LP	485/22	BUV496
	C	/	379/28	BUV395
405	A	750LP	780/60BP	BV786
	B	690LP	710/50BP	BV711
	C	630LP	660/20BP	BV650
	D	595LP	610/20BP	BV605
	E	475LP	525/50BP	BV510/V500
	F	/	450/50BP	BV421/V450
488	A	685LP	695/40BP	Percp/Percpcy5.5/BB700
	B	505LP	530/30BP	FITC/BB515
561	A	750LP	780/60BP	PE-CY7
	B	655LP	670/30BP	PE-CY5
	C	600LP	610/20BP	PE-CF594
	D	550LP	575/26	PE
640	A	750LP	780/60BP	APC-CY7/APC-H7
	B	675LP	685/35BP	APC-R700/AF700
	C	/	670/14BP	APC/AF647

怎改善呢

Veblen

yiyishilihui 发表于 2021-2-26 22:38
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会不会内吞？

yiyishilihui

Veblen 发表于 2021-3-1 17:11
会不会内吞？

怎么检测是不是内吞呢？如果是，换刺激剂IL-12+IL15+IL18还是怎么办呢？

niwanmao

yiyishilihui 发表于 2021-2-28 18:39
老师，还有其他抗体，这个panel的颜色分别是FITC
BB700
BV605

你把CD14和CD19拿掉试试看。

yiyishilihui

老师，我调了一下补偿，后来的两个样本的图是这样的，请问SE还存在问题吗？这个panel的颜色分别是FITC
BB700
BV605
PE-Cy5
PE-Cy7
PE-CF594
PE
APC
BV650
BV711
BV421
FVS780

niwanmao

yiyishilihui 发表于 2021-3-2 16:21
老师，我调了一下补偿，后来的两个样本的图是这样的，请问SE还存在问题吗？这个panel的颜色分别是FITC
BB70 ...

SE通过补偿调不好的，跟荧光素、通道本身特性等有关。
建议你先试一个AF488只有CD3的看看效果