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楼主: niwanmao

抗PD-1抗体药物的受体占用率测量

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发表于 2022-10-25 14:33:06 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2020-5-11 20:43
你的算法里面,比这条公式多一个减去背景这个步骤,在流式上,这条公式没有问题。
RO是受体占用管,TR就 ...

1. 既然同行对照是排除非特异性的结合,那么在RO管里面也应该加入同行对照管,才对吧?
2. 在TR管里,竟然没有加入JS001,而且应该是加入过量的JS001,才可以测得total receptor,结果流程图中没有,这里是不是弄错呢?
当然也不排除我理解错了哈,请老师解答一下哈。
网站上没有显示我的回复,所以只有试着再发一次哈
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发表于 2022-10-25 21:44:56 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2020-5-11 20:43
你的算法里面,比这条公式多一个减去背景这个步骤,在流式上,这条公式没有问题。
RO是受体占用管,TR就 ...

1. 既然同型对照是排除非特异性的结合,那么在RO管里面也应该加入同行对照管,才对吧?
2. 在TR管里,竟然没有加入JS001,而且应该是加入过量的JS001,才可以测得total receptor,结果流程图中没有,这里是不是弄错呢?
当然也不排除我理解错了哈,请老师解答一下哈。1. 既然同行对照是排除非特异性的结合,那么在RO管里面也应该加入同行对照管,才对吧?
3. 在TR管里,竟然没有加入JS001,而且应该是加入过量的JS001,才可以测得total receptor,结果流程图中没提到,这里是不是弄错呢?
当然也不排除我理解错了哈,请老师解答一下哈。
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发表于 2022-10-26 19:58:31 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2020-5-11 20:43
你的算法里面,比这条公式多一个减去背景这个步骤,在流式上,这条公式没有问题。
RO是受体占用管,TR就 ...

1. 既然同型对照是排除非特异性的结合,那么在RO管里面也应该加入同行对照管,才对吧?
2. 在TR管里,竟然没有加入JS001,而且应该是加入过量的JS001,才可以测得total receptor,结果流程图中没有,这里是不是弄错呢?
当然也不排除我理解错了哈,请老师解答一下哈。1. 既然同行对照是排除非特异性的结合,那么在RO管里面也应该加入同行对照管,才对吧?
2. 在TR管里,竟然没有加入JS001,而且应该是加入过量的JS001,才可以测得total receptor,结果流程图中没有,这里是不是弄错呢?
当然也不排除我理解错了哈,请老师解答一下哈。
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2022-11-7 23:40:05 | 显示全部楼层
还是回到上图,CRO是对照组,理论上应是零,因为检测抗体是与JS001结合,CRO组没有加入JS001,所以检测抗体没办法结合,那么RO%应该接近0,再怎么也达不到20%左右。
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发表于 2022-11-7 23:41:27 | 显示全部楼层
还是回到上图,CRO是对照组,理论上应是零,因为检测抗体是与JS001结合,CRO组没有加入JS001,所以检测抗体没办法结合,那么RO%应该接近0,再怎么也达不到20%左右。
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发表于 2023-1-3 13:55:56 | 显示全部楼层
请教一个关于补偿的问题,在这组实验中,不同处理组的PE通道的MFI应该是不一样的,那这种情况下如果是固定PE的电压收样,每个组的补偿值也应该不同吧?文献中的组别有: CRO:基线空白; LRO:血样与JS001孵育(终浓度:0.59 pmol / l); HRO:血样与JS001孵育(终浓度:37.87 pmol / l)。
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发表于 2024-6-5 14:44:03 | 显示全部楼层
Veblen 发表于 2022-10-24 23:58
老师,请问这里的TR管,为什么加上IgG4 Fc'-PE的抗体就可以作为total receptor的值呢?
我的理解,在TR管 ...

这一点我也百思不得其解,我也觉得对照管应该是加入饱和的药物(加入饱和药物保证100%被占用也就是受体的总水平);文章这里加一个药物的同型物,而且理论上和受体又没有任何结合作用,这个测的是什么含义呢?要么直接用受体的抗体去测,测到受体的总水平也能讲的通,但这样就不是平行检测的实验设计了。
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发表于 2024-6-6 09:32:25 | 显示全部楼层
liuqi 发表于 2024-6-5 14:44
这一点我也百思不得其解,我也觉得对照管应该是加入饱和的药物(加入饱和药物保证100%被占用也就是受体的 ...

Human IgG4 anti-PD-1 antibodies (JS001) were evaluated for RO bioanalysis. A 100 μl blood sample was aliquoted into two different tubes labeled as RO tube and total receptor tube (TR tube), respectively. Blood sample in TR tube was incubated with 3 μg of JS001, or human IgG4 isotype control antibody (Biovision, CA, USA) for 30 min at 25◦C.
按原文的描述应该是3 ug的JS001和human IgG4 isotype一起组成toal管,RO管的处理应该在后面3ug的JS001是真正的toal值human IgG4 isotype应该是为了证明这个toal是我们要的。
The whole blood sample was incubated with JS001 at a twofold serial dilution starting from 330 pmol/l 15-times in order to determine the optimal drug concentration for low RO (LRO) and high RO (HRO) via method。
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发表于 2024-6-6 10:02:36 | 显示全部楼层
司徒随风 发表于 2024-6-6 09:32
Human IgG4 anti-PD-1 antibodies (JS001) were evaluated for RO bioanalysis. A 100 μl blood sample  ...

我还是先仔细研究一下原文再来讨论。
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